Ксенобиотик фенилфенол - промышленно значимое ароматическое соединение, применяемое в качестве фунгицида при обработке сельскохозяйственной про-дукции. Цель исследования - изучить влияние ксено-биотика фенилфенола на активность комплекса вне-клеточных лигнолитических ферментов Lentinula edodes и способность к биодеградации фенилфенола с помощью этого комплекса. Задачи исследования: изме-рить активность лигнолитических ферментов L. edodes в процессе культивирования при добавлении фенилфенола в различных концентрациях; оценить накопление биомассы L. edodes при добавлении фенил-фенола; установить снижение содержания фенилфено-ла в среде после культивирования. Объектом исследо-вания являлся лигнолитический гриб L. edodes W4. Культивирование проводили глубинным способом. В среду добавляли фенилфенол в концентрациях 0,01; 0,1 и 1 мМ. Изменение активности фенолокисляющих ферментов (лакказы, пероксидазы, марганец-пероксидазы) определяли в культуральной жидкости с помощью спектрофотометра, общую сумму фенольных соединений в среде определяли также спектрофото-метрически, стандартным методом Фолина-Чокальтеу. Показано, что внесение фенилфенола в среду для культивирования в концентрации 0,01 мМ увеличивало активность лакказ на 45 % по сравнению с контролем. Напротив, добавление фенилфенола инги-бировало образование Mn-пероксидаз - активность снижалась в 2,5 раза относительно контроля. Внесение фенилфенола также индуцировало образование перок-сидаз, однако уровень пероксидазной активности оста-вался незначительным. Также установлено, что лигно-литический комплекс ферментов L. edodes способен разрушать фенилфенол при концентрациях фунгицида до 0,1 мM. Полученные результаты позволяют счи-тать, что способность к деградации ксенобиотиков фенольной природы, вызываемой комплексом лигноли-тических ферментов Lentinula edodes, является пер-спективным для дальнейшего изучения.
Lentinula edodes, лигнолитические ферменты, лакказы, Mn-пероксидазы, пероксидазы, фе-нилфенол
1. Nde С.W., Jang H.-J., Toghrol F., Bentley W.E. Toxicogenomic response of Pseudomonas aeruginosa to ortho-phenylphenol // BMC Genomics. - 2008. - Vol. 9. - P. 473-491.
2. Bomhard E.M., Brendler-Schwaab S.Y., Freyberger A., Herbold B.A., Leser K.H., Richter M. O-Phenylphenol and its Sodium and Potassium Salts: A Toxicological As-sessment // Critical Reviews in Toxicology. - 2002. - Vol. 32 (6). - P. 551-626.
3. Perruchon С., Patsioura V., Vasileiadis S., Karpouzas D. Isolation and characterisation of a Sphingomonas strain able to degrade the fungicide ortho-phenylphenol // Pest Management Science. - 2016. - Vol. 72 (1). - P. 113-124.
4. Bratkovskaya I., Ivanec R., Kulys J. Mediator Assisted Laccase Catalyzed Oxidation of 4 Hydroxybiphenyl // Biokhimiya. - 2006. - Vol. 71 (5). - P. 681-686.
5. Фазылова Г.Ф., Валинурова Э.Р., Хатмуллина Р.М. и др. Сорбционные параметры производных фенолов на различных углеродных материалах // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2013. - Т. 13. - № 5. - С. 728-735.
6. Asgher M., Bhatti H.N., Ashraf M., Legge R.L. Recent developments in biodegradation of industrial pollutants by white rot fungi and their enzyme system // Biodegra-dation. - 2008. - Vol. 19. - P. 771-783.
7. Piscitelli A., Giardina P., Lettera V., Pezzella C., Sannia G., Faraco V. Induction and Transcriptional Regulation of Laccases in Fungi // Current Genomics. - 2011. - Vol. 12. - № 2. - P. 104-112.
8. Величко Н.А., Берикашвили З.Н. Активности окисли-тельных и целлюлолитических ферментов гриба Pleurotus astreatus // Вестн. КрасГАУ. - 2008. - № 6. - С. 320-322.
9. Кадималиев Д.А., Ревин В.В., Атыкян Н.А. и др. Участие лакказы и пероксидазы гриба Lentinus (Panus) tigrinus в биодеградации высоких концентраций фенола в жидких средах // Прикладная биохимия и микробиология. - 2011. - Т. 47. - № 1. - С. 73-78.
10. Karas A.P., Perruchon С., Exarhou K., Ehaliotis C., Karpouzas D. Potential for bioremediation of agro-industrial effluents with high loads of pesticides by select-ed fungi // Biodegradation. - 2011. - Vol. 22. - № 1. - P. 215-228.
11. Nagai M., Sato T., Watanabe H., Saito K., Kawata M., Enei H. Purification and characterization of an extracellu-lar laccase from the edible mushroom Lentinula edodes, and decolorization of chemically different dyes // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2002. - Vol. 60. - № 3. - P. 327-335.
12. Wong D.W.S. Structure and Action Mechanism of Ligninolytic Enzymes // Applied Biochemistry and Biotechnology. - 2009. - Vol. 157. - № 2. - P. 174-209.
13. Позднякова Н.Н., Никифорова С.В., Макаров О.Е. и др. Влияние полициклических ароматических углеводородов на продукцию лакказы грибом белой гни-ли Pleurotus ostreatus D1 // Прикладная биохимия и микробиология. - 2011. - Т. 47. - № 5. - С. 595-601.
14. Glukhova L.B., Sokolyanskaya L.O., Plotnikov E.V., Gerasimchuk A.L., Karnachuk O.V., Solioz M., Karnachuk R.A. Increased mycelial biomass production by Lentinula edodes intermittently illuminated by green light emitting di-odes // Biotechnol. Lett. - 2014. - Vol. 36. - № 11. - P. 2283-2289.
15. Tsujiyama S., Muraoka T., Takada N. Biodegradation of 2,4-dichlorophenol by shiitake mushroom (Lentinula edodes) using vanillin as an activator // Biotechnol. Lett. - 2013. - Vol. 35. - № 7. - P. 1079-1083.
16. Saeki N., Takeda H., Tanesaka E., Yoshida M. Induction of manganese peroxidase and laccase by Lentinula edodes under liquid culture conditions and their isozyme detection by enzymatic staining on native-PAGE // Mycoscience. - 2011. - Vol. 52. - № 132. - P. 132-136.
17. Blainski А., Lopes G.C., Mello C.P. Application and Analysis of the Folin Ciocalteu Method for the Determi-nation of the Total Phenolic Content from Limonium Brasiliense L. // Molecules. - 2013. - Vol. 18. - № 6. - P. 6852-6865.
18. Plotnikov E.V., Glukhova L.B., Sokolyanskaya L.O., Karnachuk O.V., Solioz M. Effect of Tree Species on Enzyme Secretion by the Shiitake Medicinal Mushroom, Lentinus edodes (Agaricomycetes) // International Jour-nal of Medicinal Mushrooms. - 2016. - Vol. 18. - № 7. - P. 637-644.
19. Tanesaka E., Saeki N., Kochi A., Yoshida M. Enzymatic Staining for Detection of Phenol-Oxidizing Isozymes In-volved in Lignin-Degradation by Lentinula edodes on Native-PAGE // Gel electrophoresis - Advanced tech-niques. InTech. - 2012. - Р. 393-412.
