Russian Federation
Russian Federation
Russian Federation
Kazan, Russian Federation
Kazan, Kazan, Russian Federation
UDK 582 Систематика растений
UDK 636.2 Крупные жвачные животные. Крупный рогатый скот
The purpose of the study is to determine the activity of the developed experimental samples of a complex product for the group prevention and treatment of infectious diseases of the distal extremities of cattle against microscopic fungi of the genus Aspergillus, Fusarium, Penicillium and Candida. When selecting components for creating experimental samples of a product in powder form for group prevention and treatment of infectious diseases of the distal limbs of cattle using the dry foot bath method, the presence of adsorption, bactericidal and fungicidal properties was taken into account. The following components were used for dry foot baths: adsorbents (bentonite, zeolite, kieselguhr), sodium benzene sulfochloramide, sodium hydroxide, cal¬cium hypochlorite, zinc oxide and sulfate, copper sulfate and additional components taken in various proportions. The fungicidal activity of experimental samples coded CB, CB1 and CB2 against microscopic fungi Aspergillus, Fusarium, Penicillium and Candida was determined in accordance with Guideline 4.2.3676-20 “Methods of laboratory research and testing of disinfectants to assess their effectiveness and safety ". The greatest fungicidal activity against yeast fungi C. albicans (concentration 4 %, 60 min of contact), filamentous fungi A. niger, A. flavus, F. poae, F. sp, P. sp and P. notatum (concentration from 4 to 6 %, 120 min of contact) showed a sample coded SV. The remaining samples SV1, SV2 and Lubisan Eco turned out to be less effective and had fungicidal activity at a concentration of 6 to 8 %.
mikroskopicheskie, drozhzhevye griby, suhie nozhnye vanny, fungicidnaya aktivnost', lechenie, profilaktika
Введение. Массовые поражения дистального отдела конечностей являются причиной значительного экономического ущерба, причиняемого животноводству Российской Федерации [1, 2]. Неудовлетворительная организация профилактики и лечения крупного рогатого скота с болезнями конечностей приводит к потере продуктивности и преждевременной выбраковке до 70 % животных, что снижает рентабельность производства молока и мяса [3, 4].
В условиях сельхозпредприятий, неблагополучных по массовым заболеваниям дистального отдела конечностей крупного рогатого скота, значительное распространение получают микроскопические грибы [5–9], которые могут способствовать развитию инфекционного процесса, локализованного в области пальцев и копытец, поэтому большое значение имеет разработка средств профилактики и лечения этих болезней, обладающих выраженными фунгицидными свойствами.
Одним из эффективных методов недопущения широкого распространения болезней пальцев и копытец является применение групповой профилактики с использованием ножных ванн [10–12], которые широко применяются во многих сельхозпредприятиях. Однако в большинстве регионов нашей страны с холодной и продолжительной зимой проведение влажных ножных ванн проблематично и недостаточно эффективно, так как при низких температурах дезинфицирующие растворы теряют активность. Кроме того, при постоянном проведении таких ванн повышается влажность и нарушается микроклимат в помещениях, а напольные покрытия становятся скользкими, что приводит к травматизму.
Сухие ножные ванны в отличие от влажных могут использоваться без приобретения и установки специальных ванн, вместе с подстилочным материалом, имеют широкий температурный диапазон, легко дозируются добавлением порошка по мере его расхода. Кроме того, сухие ножные ванны будут способствовать снижению влажности помещений и напольных покрытий, что окажет неблагоприятное влияние на развитие микроскопических грибов и бактерий.
В связи с этим разработка и внедрение в ветеринарную практику сухих ножных ванн как дополнительного средства профилактики и терапии болезней дистального отдела конечностей крупного рогатого скота, снижающих грибковую и бактериальную обсемененность помещений и напольных покрытий, является весьма актуальной задачей.
Цель исследования – определение активности разработанных экспериментальных образцов комплексного средства для групповой профилактики и лечения инфекционных болезней дистального отдела конечностей крупного рогатого скота в отношении микроскопических грибов рода Aspergillus, Fusarium, Penicillium и Candida.
Объекты и методы. При подборе компонентов для создания экспериментальных образцов средства в форме порошка для групповой профилактики и лечения инфекционных болезней дистального отдела конечностей крупного рогатого скота методом сухих ножных ванн учитывали наличие адсорбционных, бактерицидных и фунгицидных свойств.
В качестве компонентов средства для сухих ножных ванн использовали: адсорбенты (бентонит, цеолит, кизельгур), бензолсульфохлорамид натрия, гидроксид натрия, гипохлорит кальция, оксид и сульфат цинка, медный купорос и дополнительные компоненты, взятые в различных соотношениях.
Разрабатываемые лекарственные формы для сухих ножных ванн, имеющие различные комбинации указанных выше ингредиентов, готовили в виде легко дозируемых сложных порошков, удобных для наружного применения. Все смешиваемые сухие вещества предварительно измельчали до одинаковой степени мелкости с помощью лабораторной зерновой мельницы типа СИ ЛЗМ-1, затем объединяли и механически перемешивали.
Проводили изучение фунгицидной активности трех экспериментальных образцов под шифрами «СВ», «СВ1» и «СВ2». В качестве препарата сравнения выбрано сухое дезинфицирующее средство «Любисан Эко».
Фунгицидную активность экспериментальных образцов в отношении микроскопических грибов Aspergillus, Fusarium, Penicillium и Candida, выделенных с объектов ветеринарного надзора ООО «Сабанчеевское» Атяшевского района Республики Мордовия, выполняли по Руководству 4.2.3676-20 «Методы лабораторных исследований и испытаний дезинфицирующих средств для оценки их эффективности и безопасности» [13].
Грибы высевали на плотную питательную среду Сабуро и идентифицировали согласно атласам-определителям.
Выделенные полевые изоляты грибов рода Aspergillus, Fusarium, Penicillium и Candida культивировали на бульоне и агаре Сабуро при температурном режиме от 22 до 28 °С в течение 2–10 сут. Споры и мицелий грибов брали микробиологической петлей из пробирки, помещали в фарфоровую ступку и растирали с небольшим количеством стерильного физиологического раствора до гомогенной суспензии с минимальным размером частиц. Полученную взвесь фильтровали через стерильный ватно-марлевый фильтр, доводя концентрацию суспензии до 2 · 109 КОЕ/мл по стандарту мутности.
Экспериментальные образцы комплексного средства для суспензионного метода готовили в концентрациях: 8,0; 6,0; 4,0; 2,0; 1,0; 0,5 % на стерильной питьевой воде с добавлением 0,5 мл суспензии микроскопических грибов (в концентрации 2 · 109 КОЕ/мл) с последующими высевами на агар Сабуро. В контроле использовали стерильную питьевую воду вместо экспериментальных образцов разрабатываемого комплексного средства.
За минимальную фунгицидную концентрацию принимали концентрацию комплексного средства, полностью предотвращающую формирование колоний микроскопических грибов. Эффективной считали концентрацию экспериментальных образцов, при которой трижды повторенный опыт при определенном времени воздействия дает отрицательный результат (отсутствие роста грибов) при наличии типичного роста тест-гриба в контроле [13].
Результаты и их обсуждение. Результаты определения фунгицидной активности экспериментальных образцов комплексного средства в отношении микроскопических грибов рода Aspergillus, Fusarium, Penicillium и Candida представлены в таблице.
Фунгицидная активность разработанных экспериментальных образцов (n = 3)
Изолят |
Шифр образца |
Концентрация раствора экспериментального образца, % |
Контроль стерильности питательной среды |
Контроль стерильности рецептуры |
Контроль роста м/о |
|||||
8,0 |
6,0 |
4,0 |
2,0 |
1,0 |
0,5 |
|||||
120 мин контакта |
||||||||||
A. niger |
СВ |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
+ |
+ |
– |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
A. flavus |
СВ |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
F. poae |
СВ |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Fusarium sp. |
СВ |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
+ |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Penicillium sp. |
СВ |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
P. notatum |
СВ |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
60 мин контакта |
||||||||||
C. albicans |
СВ |
– |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
СВ1 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
СВ2 |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
|
Любисан Эко |
– |
– |
+ |
+ |
+ |
+ |
– |
– |
+ |
Примечания: «–» – отсутствие роста; «+» – наличие роста.
Результаты исследования свидетельствуют, что наибольшую фунгицидную активность в отношении дрожжевых грибов C. albicans (концентрация 4 %, 60 минут контакта), мицелиальных грибов A. niger, A. flavus, F. poae, Fusarium sp., Penicillium sp. и P. notatum (концентрация от 4 до 6 %, 120 мин контакта) показал образец под шифром «СВ», в состав которого в качестве наполнителя входит бентонит. Менее выраженной фунгицидной активностью при концентрации от 6 до 8 % обладали образцы под шифрами «СВ1», «СВ2» и «Любисан Эко», имеющие в своем составе цеолит, кизельгур и смесь минеральных адсорбентов (каолин, цеолит, бентонит), соответственно.
Заключение. Таким образом, при изучении фунгицидной активности в отношении изолятов микроскопических грибов был отобран наиболее эффективный образец под шифром «СВ», который превосходит коммерческий препарат сравнения.
Предлагаемая композиция при использовании в сухих ножных ваннах и местах прогона животных снизит микробную обсемененность напольных покрытий и кожных покровов, тем самым расширит ассортимент средств групповой неспецифической профилактики и лечения начальных (мацерации, микротравмы, свежие раны и т. д.) и средних стадий развития инфекционных болезней дистального отдела конечностей крупного рогатого скота после дальнейших всесторонних исследований.
1. Zhurba V.A., Kovalev I.A., Labkovich A.V. Lechebno-profilakticheskie meropriyatiya pri gnoyno-nekroticheskih porazheniyah v oblasti pal'cev u krupnogo rogatogo skota na molochnyh kompleksah: rekomendacii. Vitebsk: VGAVM, 2019. 24 s.
2. Sidorchuk A.A., Belkina Yu.V., Pchel'nikov A.V. Rekomendacii po primeneniyu nozhnyh vann dlya profilaktiki i lecheniya gnoyno-nekroticheskih porazheniy kopytec u krupnogo rogatogo skota. M.: Rosinformagroteh, 2022. 20 s.
3. Vorob'ev A.L., Vorob'ev N.N., Shilov G.M. Preparat dlya lecheniya nekrobakterioza krupnogo rogatogo skota // Effektivnoe zhivotnovodstvo. 2021. № 2. S. 51–53.
4. Huzin D.A. Metodicheskie rekomendacii po diagnostike, lecheniyu i profilaktike nekrobakterioza, pal'cevogo dermatita i bolezney kopytec krupnogo rogatogo skota nezaraznoy etiologii. Kazan': FCTRB-VNIVI, 2022. 77 s.
5. Plesnevye griby i piogennye bakterii – prichiny bolezney pal'cev i kopytec u korov / R.M. Potehina [i dr.] // Veterinarnyy vrach. 2021. № 2. S. 44–49.
6. Sluchay mikoza ptic, vyzvannyy toksigennym izolyatom Fusarium proliferatum / R.M. Potehina [i dr.] // Vestnik Mariyskogo gosudarstvennogo universiteta. Ser. «Sel'skohozyaystvennye nauki. Ekonomicheskie nauki». 2019. T. 5, № 3 (19). S. 316–322.
7. Analitika dannyh rasprostraneniya T-2 toksina v Respublike Tatarstan / I.N. Shtyrov [i dr.] // Mezhdunarodnyy vestnik veterinarii. 2021. № 1. S. 167–172.
8. Zeolite, hepatoprotector and probiotic for aflatoxicosis in pigs international / L. Matrosova [et al.] // International Journal of Mecha¬nical and Production Engineering Research and Development. 2020. Vol. 10. P. 7053.
9. Biodiversity of mycelial fungi in fresh water in the territory of the park «mari chodra» of the Russian Federation / R.M. Potekhina [et al.] // Systematic Reviews in Pharmacy. 2020. Vol. 11, № 12. P. 1464–1472.
10. Porazheniya zheludochno-kishechnogo trakta u krupnogo rogatogo skota gribami Candida albicans / R.M. Potehina [i dr.] // Vesnik KrasGAU. 2022. № 5. S. 49–51.
11. Analiz rynka dezinficiruyuschih sredstv, ispol'zuemyh v otdel'nyh zhivotnovodcheskih hozyaystvah Privolzhskogo federal'nogo okruga / E.Yu. Tarasova [i dr.] // Veterinarnyy vrach. 2022. № 3. S. 58–66.
12. Sidorchuk A.A., Belkina Yu.V., Pchel'nikov A.V. Effektivnost' preparatov dlya nozhnyh vann pri porazheniyah kopytec krupnogo rogatogo skota // Aktual'nye problemy veterinarnoy mediciny, biotehnologii i morfologii: sb. tr. nac. nauch.-prakt. konf. Kinel': Samarskiy GAU, 2021. S. 168–172.
13. R 4.2.3676-20. Metody laboratornyh issledovaniy i ispytaniy dezinfekcionnyh sredstv dlya ocenki ih effektivnosti i bezopasnosti (utv. Rukovoditelem Federal'noy sluzhby po nadzoru v sfere zaschity prav potrebiteley i blagopoluchiya cheloveka, Glavnym gosudarstvennym sanitarnym vrachom Rossiyskoy Federacii A.Yu. Popovoy 18.12.2020) / Feder. sluzhba po nadzoru v sfere zaschity prav potrebiteley i blagopoluchiya cheloveka. M., 2021. 492 s.