UDK 615.2 Лекарственные средства по их основному действию
UDK 615.9 Токсикология. Учение о ядовитых веществах. Отравления
UDK 636.5 Домашняя птица
The purpose of research is to study the relationship between the microbiological indicators of fish infected with diplostomosis and post-diplostomosis, and the indicators of veterinary and sanitary safety of water bodies involved in its cultivation. Objectives: determination of the main parasitological indicators of infected fish (intensity of invasion (II), extensiveness of invasion (EI), species predisposition of fish to pathogens of trematodes); conducting a microbiological analysis of the obtained fresh fish and the place of its cultivation, taking into account the degree of infestation of the fish by pathogens of diplostomosis and post-diplostomosis. The study was conducted in the conditions of the North Caucasus Zonal Research Veterinary Institute in the summer and autumn seasons of the year. The study material included fish of different species: Hypophthalmichthys molitrix (silver carp), Cyprinus carpio (carp), Ctenopharyngodon idella (grass carp), Abramis brama (Bream), both infected with trematodes and clinically healthy. The water of the fish catchment site, taken from the Nizhnedonsky canal, Veselovsky, Proletarsky and Tsimlyansky re¬servoirs, was studied. The lowest AI and EI were found in fish of the species Ctenopharyngodon idella (grass carp). AI in silver carp compared to grass carp was 11.3 times higher, in carp – 9.3 times, in bream – 6.6 times; EI was 11.3 times higher in silver carp and 11.0 times higher in carp; for bream – 3.3 times. In highly invasive fish of the species Hypophthalmichthys molitrix (silver carp), Cyprinus carpio (carp), mesophilic aerobes and facultative anaerobic microorganisms were found to be 14.7 and 4.24 times more, respectively, compared to healthy fish; according to the average value of detected coliform bacteria – 2.54 and 1.86; by the number of detected Staphylococcus sp. – at 24.3 and 33.15; Escherichia sp. – at 1.5 and 0.6; Klebsiella sp. – at 110 and 85; Salmonella sp. – 45 and 0.8 times more. A correlation was established between the total microbial number of water bodies and the number of mesophilic aerobes and facultative anaerobes in caught live fish (correlation coefficient 0.99).
veterinary and sanitary examination, fresh fish, microbiological indicators, trematodes, intensity of invasion (II), extensiveness of invasion (EI), water microflora
Введение. Рыбоводческая деятельность была и остается одной из ведущих отраслей в Российской Федерации, что обеспечивается огромным рыбохозяйственным фондом нашей страны. За последние 10 лет объем добычи рыбы увеличился на 47 % в сравнении с предыдущим десятилетием [1]. Благодаря инновационному оборудованию стало возможным получение высококачественной продукции, обладающей большим количеством необходимых человеку полезных веществ. Особенно активно рыбохозяйственная деятельность осуществляется на территории Южного федерального округа в связи с благоприятными климатическими условиями территорий. При всех типах рыбоводства преобладает разведение карповой, осетровой, хищной рыбы [2].
В процессе производства рыба может быть заражена патогенами бактериальной, вирусной, паразитарной этиологии, поэтому необходимо осуществлять контроль на всех этапах выработки рыбной продукции. Так, согласно ветеринарному законодательству, в свежей рыбе не допускается обнаружение жизнеспособных личинок гельминтов, опасных для здоровья человека [3]. В этот перечень возбудителей паразитарных болезней входят описторхисы, клонорхисы, псевдомфисты, метагонимусы, нанофиетусы, эхинохазмусы, меторхисы, россикотремы, апофалусы, дифиллоботрии, анизакиды и др. С целью предупреждения паразитарных болезней предусмотрен комплекс ветеринарных профилактических и лечебных мер на рыбоводческих предприятиях, проведение ветеринарно-санитарной экспертизы живой рыбы непосредственно перед ее реализацией и на перерабатывающих предприятиях [4]. Однако учету не подлежат заболевания, не оказывающие прямого воздействия на организм человека, но способные стать причиной отравлений и токсикоинфекций. К числу таких заболеваний относятся диплостомоз и постдиплостомоз, возбудителями которых являются трематоды [5]. Размер тела трематод не более 1,0 мм, они имеют вытянутую овальную форму тела, на передней части – ротовую присоску и несколько придаточных. Промежуточными хозяевами принято считать пресноводных моллюсков и рыб разных видов, окончательным или дефинитивным хозяином – рыбоядных птиц. Для человека данное заболевание не является опасным, но, по данным многих авторов, способно стать причиной снижения качества получаемой продукции рыбного происхождения, опасной для здоровья человека и животных [6]. При этом существует мнение, что рыба может быть подвержена контаминации патогенными и условно-патогенными микроорганизмами еще на этапе ее выращивания, чему способствует низкое санитарное состояние места обитания [7].
Цель исследования – изучение взаимосвязи между микробиологическими показателями рыбы, зараженной диплостомозом и постдиплостомозом, и показателями ветеринарно-санитарной безопасности водоемов, задействованных при ее выращивании.
Задачи: определение основных паразитологических показателей зараженных рыб: интенсивность инвазии (ИИ), экстенсивность инвазии (ЭИ), видовая предрасположенность рыбы к возбудителям трематодозов; проведение микробиологического анализа полученной свежей рыбы и места ее выращивания с учетом степени инвазированности рыбы возбудителями диплостомоза и постдиплостомоза.
Материалы и методы. Исследование было проведено в условиях Северо-Кавказского зонального научно-исследовательского ветеринарного института в летний и осенний сезоны года. Материалом для исследования послужила рыба разных видов – Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб), Cyprinus carpio (карп), Ctenopharyngodon idella (белый амур), Abramis brama (лещ), как зараженная трематодами, так и клинически здоровая. Изучению была также подвергнута вода места добычи рыбы, отобранная из Нижнедонского канала, Веселовского, Пролетарского и Цимлянского водохранилищ.
Паразитологическое исследование рыбы проводилось с использованием метода микроскопии ввиду небольших размеров трематод и невозможностью их обнаружения невооруженным глазом.
С целью обнаружения диплостом в глазном яблоке исследовали хрусталик глаза и стекловидное тело на наличие трематод. Пораженные постдиплостомами участки кожных покровов вскрывали скальпелем. Полученное содержимое переносили в чашку Петри. После предварительной обработки полученный материал изучали под микроскопом для подсчета особей паразитов с последующим определением ИИ и ЭИ.
Для лабораторного анализа рыбы небольшое количество мышечной ткани, но не менее 26 г, отобранной с разных частей туловища, измельчали стерильными ножницами и переносили в колбу, откуда отбиралось необходимое для исследований в последующем количество рыбного фарша.
Отбор проб воды производился с каждого участка вылова рыбы металлическим черпаком в стерильные фляги объемом 500 мл.
Микробиологический анализ рыбной продукции, воды естественных и искусственных водоемов осуществлялся после внесения исследуемого материала на общие, элективные и дифференциально-диагностические питательные среды с последующим инкубированием в заданном температурном режиме (33,5 ± 4,5°) в течение 18–48 ч [8, 9].
Расчет статистических показателей проводился согласно общепринятым математическим формулам, рекомендованным при работе с качественными и количественными величинами, полученными при проведении опыта. Для выявления взаимосвязи между сравниваемыми признаками использовался расчет линейной корреляции Пирсона, а для обозначения правильности гипотез результатов исследований – критерий Стьюдента [10].
Результаты и их обсуждение. Согласно результатам паразитологических исследований свежей рыбы, представленным в таблице 1, заражению диплостомами и постдиплостомами в наибольшей степени была подвержена рыба вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб) и Cyprinus carpio (карп). Так, результаты процентного соотношения зараженных особей составили 23,81 и 31,5 %; среднего значения обнаруженных личинок – 35,58 ± 3,95 и 17,60 ± 2,64 ед. соответственно.
Таблица 1
Результаты гельминтологического исследования рыбы, зараженной трематодами
|
Вид рыбы |
Кол-во обследованных |
Кол-во зараженных |
Интенсивность инвазии, особ/экз. |
Экстенсивность инвазии, % |
|
Толстолоб (Hypophthalmichthys molitrix) |
105 |
25 |
35,58 ± 3,95 |
23,81 |
|
Карп (Cyprinus carpio) |
103 |
24 |
17,60 ± 2,64 |
23,30 |
|
Лещ (Abramis brama) |
101 |
7 |
12,57 ± 1,22 |
6,93 |
|
Белый амур (Ctenopharyngodon idella) |
95 |
2 |
1,9 ± 0,15 |
2,11 |
Наименьшая интенсивность и экстенсивность инвазии установлена у рыб вида Ctenopharyngodon idella (белый амур), что можно расценить как их низкую предрасположенность к возбудителям трематодозов рыб. Интенсивность инвазии у толстолоба в сравнении с белым амуром была выше в 11,3 раза, у карпа – в 9,3, у леща – в 6,6 раза; экстенсивность инвазии (ЭИ) была выше у толстолоба в 11,3 раза, у карпа – в 11,0, у леща – в 3,3 раза.
Бактериологический анализ зараженной и клинически здоровой рыбы представлен в таблице 2. Как в здоровой, так и в зараженной трематодами рыбе при ее микробиологическом исследовании были обнаружены бактерии рода Staphylococcus, Escherichia, Klebsiellа, Salmonella.
Таблица 2
Бактериальная обсемененность промысловых рыб, выловленных
из естественных водоемов Волго-Донского бассейна
|
Показатель качества рыбной продукции |
Бактериальная обсемененность промысловых рыб |
||||
|
Толстолоб (Hypophthalmichthys molitrix) |
Лещ (Abramis brama) |
Карп (Cyprinus carpio) |
Белый амур (Ctenopharyngodon idella) |
||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
|
Клинически здоровая рыба |
|||||
|
БГКП (0,01 г/см3) |
0,73 ± 0,40 |
0,5 ± 0,1 |
0,7 ± 0,3 |
0,30 ± 0,11 |
|
|
КМАФАнМ, КОЕ/г (1·104) |
1,14 ± 0,037 |
1,50 ± 0,29 |
1,55 ± 0,44 |
1,10 ± 0,19 |
|
|
Микроорганизмы, обнаруженные в клинически здоровой рыбе |
|||||
|
Staphylococcus sp. (0,01 г) |
0,30 ± 0,15 |
0,10 ± 0,05 |
0,19 ± 0,08 |
0,10 ± 0,05 |
|
|
Escherichia sp. (0,01 г) |
0,20 ± 0,17 |
0,30 ± 0,17 |
– |
0,40 ± 0,23 |
|
|
Klebsiellа sp. (0,01 г) |
0,01 ± 0,005 |
0,03 ± 0,013 |
0,02 ± 0,01 |
0,06 ± 0,023 |
|
|
Salmonella sp. в 25 г продукции |
0,02 ± 0,01 |
– |
– |
– |
|
|
Рыба, зараженная личинками трематод |
|||||
|
БГКП (0,01 г/см3) |
1,86 ± 0,87 |
1,9 ± 0,56* |
1,3 ± 0,77 |
0,30 ± 0,07 |
|
|
КМАФАнМ, (КОЕ/г 1·104) |
16,8 ± 9,9*** |
6,5 ± 2,3** |
6,58 ± 3,2** |
4,58 ± 1,7** |
|
Окончание табл. 2
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
|
Микроорганизмы, обнаруженные в зараженной трематодами рыбе |
||||
|
Staphylococcus sp. (0,01 г) |
7,3 ± 3,7*** |
1,76 ± 0,9*** |
6,3 ± 3,5*** |
1,5 ± 0,7*** |
|
Escherichia sp. (0,01 г) |
0,30 ± 0,17 |
0,36 ± 0,17 |
0,6 ± 0,21 |
0,5 ± 0,37 |
|
Klebsiellа sp. (0,01 г) |
1,1 ± 0,55*** |
0,70 ± 0,33*** |
1,7 ± 0,7*** |
0,3 ± 0,02*** |
|
Salmonella sp. в 25 г продукции |
0,90± 0,36*** |
– |
0,80 ± 0,48 |
0,10 ± 0,07 |
Примечание : (*) – р ≤ 0,05; (**) – р ≤ 0,01; (***) – р ≤ 0,001 относительно незараженной рыбы.
Так, у высокоинвазированных рыб вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолоб), Cyprinus carpio (карп) мезофильных аэробов и факультативных анаэробных микроорганизмов обнаружено соответственно в 14,7 и 4,24 раза больше в сравнении со здоровой рыбой; по среднему значению обнаруженных бактерий группы кишечной палочки – в 2,54 и 1,86; по количеству обнаруженных Staphylococcus sp. в 24,3 и 33,15; Escherichia sp. – в 1,5 и 0,6; Klebsiellа sp. – в 110 и 85; Salmonella sp. – в 45 и 0,8 раза больше соответственно.
У низкоинвазированных рыб вида Abramis brama (лещ) и Ctenopharyngodon idella (белый амур) общее количество микроорганизмов превышало таковое в здоровой рыбе в 4,3 и 4,16 раза соответственно; по количеству бактерий группы кишечной палочки – в 19 и 0,1; Staphylococcus sp. – в 17,6 и 15; Escherichia sp. в 1,2 и 1,25; Klebsiellа sp. – в 2,3 и 1,75 раза соответственно.
Таблица 3
Микробное загрязнение воды в местах вылова рыбы
|
Микробиологические показатели санитарной безопасности водоема |
Водоем |
|||
|
Нижнедонской канал |
Пролетарское водохранилище |
Веселовское водохранилище |
Цимлянское водохранилище |
|
|
ОМЧ, КОЕ/мл (1·106) |
13,8 ± 5,06 |
19,6 ± 7,26 |
16,8 ± 8,21 |
13,5 ± 5,38 |
|
Коли индекс (не более 9, КОЕ/л) |
5,5 ± 0,29 |
7,6 ± 0,3 |
8,1 ± 0,8 |
4,3 ± 0,25 |
|
Коли титр (не менее 111 мл) |
152,1 ± 35,0 |
153,2 ± 35,6 |
180,0 ± 21,3 |
125,5 ± 38,4 |
|
Обнаруженные микроорганизмы (1·104 КОЕ/мл) |
||||
|
Micrococcus sp. |
2,3 ± 0,7 |
2,7 ± 0,9 |
1,4 ± 0,6 |
2,3 ± 1,0 |
|
Azotobacter sp. |
1,2 ± 0,4 |
1,7 ± 0,8 |
2,9 ± 0,7 |
3,3 ± 0,12 |
|
Pseudomonas sp. |
4,2 ± 1,1 |
3,3 ± 1,7 |
2,1 ± 0,8 |
7,4 ± 2,9 |
|
Bacillus sp. |
3,66 ± 1,6 |
9,56 ± 3,2 |
10,03 ± 4,3 |
1,0 ± 0,33 |
|
Klebsiellа sp. |
11,2 ± 3,3 |
14,3 ± 4,2 |
9,6 ± 2,7 |
8,6 ± 2,6 |
|
Escherichia sp. |
2,3 ± 0,8 |
4,3 ± 2,1 |
6,5 ± 3,2 |
2,2 ± 0,9 |
|
Staphylococcus sp. |
1,35 ± 0,21 |
1,59 ± 0,4 |
2,69 ± 0,64 |
1,20 ± 0,61 |
|
Salmonella sp. |
5,28 ± 2,7 |
12,8 ± 5,2 |
2,03 ± 1,03 |
5,8 ± 2,3 |
Поэтому с целью определения взаимосвязи между микрофлорой водоема и выловленной живой рыбы провели корреляционный анализ, при расчете которого определили показатель Пирсона в каждой исследуемой группе сравниваемых признаков. После чего определили среднее значение среди полученных величин:
Сравнивая полученный коэффициент корреляции, равный 0,99, со значением для четырех измерений, полученное число превосходило табличное не только для достоверности 95 %, но и для достоверности 99 %.
Заключение. Исходя из результатов исследования, отмечаем, что наиболее восприимчивы к трематодозам рыбы вида Hypophthalmichthys molitrix (толстолобик) и Cyprinus carpio (карп), экстенсивность инвазии которых составила 23,81 и 31,5 % соответственно; интенсивность инвазии – 35,58 ± 3,95 и 17,60 ± 2,64 особ/экз. соответственно.
При изучении сравниваемых микробиологических показателей рыб отметили, что показатели клинически здоровых, низко- и высокоинвазированных рыб отличались между собой по количеству обнаруженного КМАФАнМ, суммарного значения БКГП, в т. ч. бактерий рода Staphylococcus, Escherichia, Klebsiellа, Salmonella. Более того, при высоких ИИ и ЭИ рыбы установлены и более высокие значения показателей исследуемых микроорганизмов.
При проведении микробиологического анализа воды естественных и искусственных водоемов обнаружили высокие значения бактерий разных видов, в т. ч. патогенных, из которых отметили Klebsiellа sp., Escherichia sp. Staphylococcus sp., Salmonella sp., также диагностируемых в свежей рыбе.
Таким образом, неудовлетворительное санитарно-бактериологическое состояние водоема и сопутствующая инвазия трематодами могут стать одной из ведущих причин прижизненной контаминации рыбы условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, опасными для здоровья человека. Поэтому ветеринарно-санитарная оценка водоемов должна проводиться комплексно с включением показателей паразитологического и микробиологического состояния рыбы и микробиологических показателей санитарной безопасности водоема.
1. Semenenko S.Ya. Volgogradskoe vodohranili-sche: istoriya, problemy, resheniya // Izvestiya Nizhnevolzhskogo agrouniversitetskogo komp-leksa. Nauka i vysshee professional'noe obrazo¬vanie. 2017. № 1 (45). S. 53–63. EDN YSLEBB.
2. Dyul'ger G.P., Tabakov G.P. Osnovy veterina-rii: ucheb. posobie dlya vuzov. 3-e izd., ster. SPb.: Lan', 2020. 476 s.
3. Ataev A.M., Zubairova M.M. Ihtiopatologiya: ucheb. posobie. SPb.: Lan', 2015. 252 s.
4. Ivanov V.P., Egorova V.I., Ershova T.S. Ihtio-logiya. Osnovnoj kurs. 3-e izd., pererab. SPb.: Lan', 2017. 360 s.
5. Pronin V.V., Fisenko S.P. Veterinarno-sanitar-naya `ekspertiza s osnovami tehnologii i stan-dartizacii produktov zhivotnovodstva: prakti-kum. 3-e izd., ster. SPb.: Lan', 2018. 240 s.
6. Veterinarno-sanitarnaya `ekspertiza syr'ya i produktov zhivotnogo i rastitel'nogo proishozh-deniya: laboratornyj praktikum: ucheb. poso-bie / I.A. Lykasova [i dr.]. 2-e izd., pererab. SPb.: Lan', 2015. 304 s.
7. Izuchenie vliyaniya associativnogo proyav-leniya Cheyletiella spp. i Trichodectes spp. na citologicheskie pokazateli laboratornyh zhivot-nyh s uchetom inokulyacionnoj osobennosti / A.P. Marchenko [i dr.] // Veterinariya Kubani. 2023. № 1. S. 26–28. DOI:https://doi.org/10.33861/2071-8020-2023-1-26-28. EDN ABMYPM.
8. Sazonova E.A., Gun'ko M.V. Rasprostranennost' shtammov E. coli u razlichnyh vidov zhivotnyh i pticy // Veterinariya i kormlenie. 2023. № 3. S. 70–72. DOI:https://doi.org/10.30917/ATT-VK-1814-9588-2023-3-18. EDN RKOPBY.
9. Sazonova E.A., Gun'ko M.V. Rasprostranen-nost' shtammov E. coli u razlichnyh vidov zhivotnyh i pticy // Veterinariya i kormlenie. 2023. № 3. S. 70–72. DOI:https://doi.org/10.30917/ATT-VK-1814-9588-2023-3-18. EDN RKOPBY.
10. Issledovaniya sanitarno-gigienicheskogo sos-toyaniya lescha i vody v mestah ego obita-niya / N.A. Kanieva [i dr.] // Vestnik Astrahans¬kogo gosudarstvennogo tehnicheskogo univer¬siteta. Ser. «Rybnoe hozyajstvo». 2021. № 4. S. 39–45. DOI:https://doi.org/10.24143/2073-5529-2021-4-39-45. EDN LDMXOE.
11. Mamaev A.N., Kudlaj D.A. Statisticheskie metody v medicine. M.: Prakticheskaya medi-cina, 2021. 136 s.
