The purpose of the study is to conduct a comparative analysis of two methods for diagnosing eimeriosis in cattle and to identify the most accessible and effective of them. The spread of eimeriosis in on the territory of the training and experimental commercial dairy farm N3 Kuban was studied. When making a diagnosis, clinical signs in young and adult animals, epizootological data, as well as the results of laboratory studies of fecal samples were taken into account. In total, 215 faecal samples from Holstein cattle were examined. Fülleborn and McMaster methods were used for diagnosis. Determination of eimeria to species was carried out using the Krylov determinant. According to outpatient journals, seasonal and age-related predisposition to the disease was revealed. Of the more than 20 species of Eimeria described in cattle, the species responsible for the most pronounced manifestation of clinical signs with the phenolmenon of hemorrhagic diarrhea: E. Zuerni, E. Bovis, E. Ellipsoidalis prevail in this educational and experimental farm. It has been established that the McMaster method is the most effective and affordable for the diagnosis of eimeriosis in cattle. The age groups most vulnerable to this invasion were identified: the prevalence of invasion in calves of 1–2 months of age is 12 %; 2–4 months – 22; 4–6 months – 31 %. An analysis of the degree of manifestation of invasion was made, which showed that clinically pronounced coccidiosis, as the most economically costly form, manifests itself in 46 % of cases, while the subclinical form was detected in 54 % of the studied calves. As a result of a study of the consequences of a long-term illness of calves with eimeriosis in a subclinical form, it was concluded that there would be significant consequences in the future on the part of the gastrointestinal tract and other body systems. These factors reduce the degree of overall development and economic feasibility of keeping such calves due to a lack of muscle mass, reduced immunity and reduced milk production.
eimeriosis, cattle, invasions, diagnostics, E. Zuerni, E. Bovis, E. Ellipsoidalis
Введение. Распространение протозойного заболевания, такого как эймериоз крупного рогатого скота, в течение прошедших 5 лет значительно увеличилось, а поскольку оно протекает не только в острой, подострой, но и хронической формах, было принято решение изучить глубже причину его возникновения, а также выявить наиболее доступный и эффективный метод диагностики [1–6].
Возбудителем заболевания являются простейшие, относящиеся к подклассу Coccidia, семейству Eimeriidae. Согласно литературным источникам, в семейство Eimeriidae включены и описаны 22 рода простейших. Локализация данных паразитов чаще обнаруживается в кишечнике, тем самым провоцируя воспаление слизистой оболочки и расстройство пищеварения, что проявляется диареей и может вызывать впоследствии гибель животного [7–11].
Диагностика эймериоза крупного рогатого скота берет свое начало в 30-е гг. XX в. Тогда уже было установлено, что передача возбудителя осуществляется алиментарным путем во время контакта здоровых животных с инвазированными, а также при заражении окружающих предметов, к которым имеет доступ крупный рогатый скот. Кроме того, скученное содержание животных, несоблюдение зоогигиенических правил содержания и кормления животных, отсутствие регулярных мероприятий по профилактике заболеваний (вакцинация, дезинфекция, дезинсекция, дератизация), допущение на территорию фермы бесхозных животных и посторонних лиц – все это является предрасполагающими факторами к возникновению заболевания [12–17].
Чаще всего острому течению заболевания подвержены животные возрастом от 3–5 недель до года, тогда как у взрослых оно протекает хронически [18–22].
Цель исследования – провести сравнительный анализ двух методов диагностики эймериоза крупного рогатого скота и выделить наиболее доступный и эффективный из них.
Задачи: установить сезонную динамику заболевания крупного рогатого скота эймериозом; провести сравнительный анализ двух методов диагностики эймериоза крупного рогатого скота и установить наиболее доступный и эффективный из них.
Материалы и методы. По данным анализа эпизоотической ситуации на территории учебно-опытного хозяйства МТФ № 3 «Кубань» по инвазионным болезням было установлено, что распространение эймериоза составило 21 %. По данным амбулаторных журналов максимальная зараженность телят и взрослых животных за последние 4 года отмечается в весенний и осенний периоды, тогда как зимой и весной данный показатель составляет лишь 10–15 %. (табл. 1).
Таблица 1
Сезонная динамика экстенсивности инвазии крупного рогатого скота эймериозом,
% от общего поголовья
|
Сезон |
Возраст |
|||
|
1–2 мес. |
2–4 мес. |
4–6 мес. |
1 год и более |
|
|
Зима |
10 |
11 |
14 |
10 |
|
Весна |
12 |
22 |
31 |
11 |
|
Лето |
11 |
14 |
13 |
12 |
|
осень |
13 |
24 |
33 |
10 |
Область исследования и размер выборки. Для проведения практической части исследования были отобраны пробы фекалий от 215 животных. Исследование было решено проводить на базе кафедры паразитологии, ветеринарно-санитарной экспертизы и зоогигиены ФГБОУ Кубанского ГАУ (г. Краснодар).
Размер выборки (n = 215) был рассчитан с использованием ожидаемой распространенности Eimeria spp., которая приблизительно составляет 60 %.
Молодняк и телята были отобраны и распределены по трем возрастным группам: ≥ 1–2, 2–4 и 4–6 месяцев (с наличием клинических признаков кокцидиоза или без них). Телята, дегельминтизированные за 15 дней до взятия пробы, были исключены из исследования.
Был проведен общий клинический осмотр, в ходе которого учитывали общее состояние, аппетит, активность, наличие жвачки, диареи, рвоты, кахексии, дегидратации, качество стула и наличие визуально различимых посторонних примесей в нем. Проведена поголовная термометрия.
Непосредственно из прямой кишки исследуемых животных для проведения паразитологических исследований были отобраны фекалии массой 15 г. Фекалии были идентифицированы по номеру и кличке, возрасту и полу, и доставлены в герметичном контейнере при температуре около 10 °С на кафедру, где проводилась исследовательская работа. Пробы до их непосредственного исследования хранились герметично в холодильнике при температуре 4 °С.
Результаты и и их обсуждение. Лабораторные исследования проводили при помощи методов Макмастера и Флюллеборна:
- Методика Макмастера для определения количества фекальных ооцист на 1 г кала (О/г к.). Положительные образцы ≥ 500 О/г к. подвергали процессу споруляции с использованием 2,5 % дихромата калия в чашках Петри и инкубировали при комнатной температуре с последующей оксигенацией образцов каждые 24 ч в течение десяти дней. Ооцисты выделяли флотацией в растворе сахара (удельный вес 1,27), центрифугировали и проводили микроскопию с помощью оптического микроскопа с использованием Velab VE-87 с увеличением в 1 000 раз.
- Метод Фюллеборна. Пробы фекалий (по 3 г от каждой пробы) помещали в отдельные стерильные тары, к ним добавляли флотационную жидкость в размере 20 мл, перемешивали для создания однородной массы, после чего добавляли еще 80 мл раствора. Полученные взвеси процеживали через марлю (в 1 слой) в сухие стерильные стаканы. В таком виде взвеси оставляли на 50 мин при комнатной температуре для отстаивания, после чего образовавшиеся поверхностные пленки снимали при помощи петель и переносили их на предметные стекла для последующего микроскопирования.
Идентификация была проведена в соответствии с фенотипическими характеристиками спорулированных ооцист в соответствии с определителем Крылова (рис.).
По результатам проведенных исследований было установлено 72 инвазированных эймериями животных (табл. 3).
Таблица 2
Морфология обнаруженных ооцист эймерий
|
Вид |
Морфология ооцисты |
Размер ооцисты, мкм |
|
E. bovis |
Яйцевидная или субсферическая, бесцветная и гладкая стенка с незаметными микропилями, без полярных гранул |
28 × 20 |
|
E. zuernii |
Субсферический, бесцветный, без микропиль |
18 × 16 |
|
E. ellipsoidalis |
Эллипсоидальная или слегка яйцевидная, бесцветная, без видимых микропиль, полярных гранул |
23 × 16 |
Изображения спорулированных ооцист вида Eimeria, полученные с помощью
оптического микроскопа (увеличение 1000 раз): A – E. Bovis; B – E. Zuernii; H – E. Ellipsoidalis,
согласно определителю Крылова
Таблица 3
Инвазированность эймериями крупного рогатого скота по возрастным группам (М)
|
Возрастная группа |
Инвазированные животные, гол. |
|
1–2 мес. |
16 |
|
2–4 мес. |
19 |
|
4–6 мес. |
24 |
|
1 год и более |
13 |
Экстенсивность инвазии подсчитывалась по следующей формуле:
Эинв = число инвазированных Eimeria / общее число животных выборки · 100 %.
Эинв = 72/215·100 % = 33 %.
Заключение. Было установлено, что наибольший процент заболевания крупного рогатого скота эймериозом наблюдается весной и осенью, тогда как зимой и летом он значительно снижен. Чаще заболевание диагностируется у телят возрастом 4–6 месяцев, тогда как крупный рогатый скот от года и старше подвержен данному заболеванию значительно меньше.
При проведении лабораторных исследований проб фекалий было определено, что метод Макмастера является более эффективным в связи с точным определением количества фекальных ооцист в стадии споруляции. Однако наиболее доступным методом остается метод Фюллеборна ввиду меньшей трудоемкости и быстроты проведения. В связи с этим было решено рекомендовать метод Макмастера как наиболее надежный и точный метод, а метод Фюллеборна – в качестве способа быстрого определения наличия инвазии в хозяйстве.
1. Spravochnik veterinarnogo fel'dshera: ucheb. posobie dlya SPO / A.A. Aliev [i dr.]; sost. G.A. Kononov. SPb.: Lan', 2022. 896 s.
2. Bolezni krupnogo rogatogo skota: ucheb. posobie / A.M. Ataev [i dr.]. Mahachkala: DagGAU im. M.M. Dzhambulatova, 2016. 295 s.
3. Konova G.A. Spravochnik veterinarnogo fel'dshera / pod red. G.A. Konova. SPb.: Lan', 2022. S. 2.
4. Latypov D.G., Timerbaeva R.R., Kirillov E.G. Parazitologiya i invazionnye bolezni zhvachnyh zhivotnyh: ucheb. posobie. SPb.: Lan', 2022. 286 s.
5. Korrekciya vosproizvoditel'noy funkcii korov s ostroy subinvolyuciey matki / B.V. Gavrilov [i dr.] // Tr. Kuban. gos. agrar. un-ta. 2019. № 76. S. 173–176.
6. Profilaktika reproduktivnyh rasstroystv u korov / M.A. Beloborodenko [i dr.] // Veterinariya Kubani. 2016. № 2. S. 10–12.
7. Lazeroterapiya i lazeropunktura pri akushersko-ginekologicheskih zabolevaniyah korov / G.V. Kazeev [i dr.] // Veterinariya. 2002. № 2. S. 34.
8. Rodin I.A. Genetiko-immunologicheskie aspekty profilaktiki mastita i vzaimoobuslovlennyh s nim endometrita u korov i diarei novorozhdennyh telyat: dis. … d-ra veterinar. nauk. Krasnodar, 2002.
9. Sovershenstvovanie laboratornogo analiza s primeneniem innovacionnyh tehnologiy / I.A. Rodin [i dr.] // Opyt mezhdunarodnogo sotrudnichestva v oblasti ekologii, lesnogo hozyaystva, veterinarnoy mediciny i ohotovedeniya (Letnyaya shkola – Kuban' 2011): mat-ly II Mezhdunar. nauch.-prakt. konf., posvyasch. 90-letiyu obrazovaniya Kubanskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. Krasnodar, 2011. S. 172–176.
10. Dopolnitel'nyy laboratornyy analiz veterinarno-sanitarnogo napravleniya: vyyavlenie toksinov i mikroorganizmov s primeneniem cifrovyh tehnologiy / S.N. Povetkin [i dr.] // Uchenye zapiski Kazanskoy gosudarstvennoy akademii veterinarnoy mediciny im. N.E. Baumana. 2014. T. 220, № 4. S. 188–191.
11. Veterinarno-sanitarnyy i mikrobiologicheskiy kontrol' v konservnom proizvodstve / B.V. Ben'ko [i dr.] // Prioritetnye i innovacionnye tehnologii v zhivotnovodstve – osnova modernizacii agropromyshlennogo kompleksa Rossii: sb. nauch. st. po mat-lam Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. nauchnyh sotrudnikov i prepodavateley. Stavropol', 2017. S. 408–415.
12. Dinamika uglevodno-lipidnogo obmena pri nespecificheskoy terapii zabolevaniy reproduktivnogo apparata u korov / S.S. Vachevskiy [i dr.] // Veterinariya Kubani. 2012. № 21. S. 5–7.
13. Vliyanie A-PRP-terapii na reparativnuyu regeneraciyu kostnoy tkani pri svezhih perelomah kostey konechnostey / A.N. Blazhenko [i dr.] // Innovacionnaya medicina Kubani. 2019. № 3 (15). S. 32–38.
14. Etiologiya, profilaktika i lechenie sel'skohozyaystvennyh zhivotnyh i pticy pri massovyh boleznyah molodnyaka s gastroenteral'nym i respiratornym sindromami / N.P. Zuev [i dr.]; Belgorod. gos. agrar. un-t im. V.Ya. Gorina. Belgorod, 2015.
15. Pat. RU 2134116 C1. Sposob kompleksnoy profilaktiki i lecheniya endometritov, mastitov u korov i dispepsii u ih potomstva / Rodin I.A., Perebora A.V. № 98105795/ 13; zayavl. 25.03.1998, opubl. 10.08.1999.
16. Sostav mastitogennoy mikroflory korov / A.V. Egunova [i dr.] // Aktual'nye problemy sovremennoy veterinarnoy nauki i praktiki: mat-ly mezhdunar. nauch.-prakt. konf., posvyasch. 70-letiyu Krasnodarskogo nauchno-issledovatel'skogo veterinarnogo instituta / Krasnodar. nauchno-issledovatel'skiy veterinarnyy in-t; Kuban. gos. agrar. un-t. Krasnodar, 2016. S. 371–373.
17. Profilaktika mastita vysokoproduktivnyh korov v usloviyah OAO «Agroob'edinenie «Kuban'» / V.V. Novikov [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2019. № 3 (77). S. 224–227.
18. Stimulyaciya osteoregeneracii s pomosch'yu PRP-terapii / I.A. Rodin [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2018. № 3 (71). S. 186–190.
19. Ocenka deystviya gonadotropinov na korov-donorov pri transplantacii zigot / B.V. Gavrilov [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2019. № 1 (75). S. 175–178.
20. Effect of training on femur mineral density of rats / N.G. Belyaev [et al.] // Biochemical and Cellular Archives. 2019. T. 19, № 2. S. 3549–3552.
21. Formirovanie grupp riska sobak po onkologicheskim zabolevaniyam na osnovanii rezul'tatov mnogofaktornogo analiza, opredelyayuschih i sposobstvuyuschih razvitiyu dannoy patologii faktorov / S.P. Hanhasykov [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2018. № 6 (74). S. 164–166.
22. Osteodistrofiya ovec v usloviyah Respubliki Buryatii / V.V. Tokar' [i dr.] // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2018. № 6 (74). S. 159–161.
