Россия
Цель исследования – изучение фенотипического эффекта генотипов полиморфного гена кальпаина (CAPN1) на живую массу у овец пород калмыцкая курдючная и их помесей с породами шароле и дорпер для обоснования возможности генетического маркирования продуктивности в раннем возрасте. Задачи – проведение генотипирования и учета показателей продуктивности животных калмыцкой курдючной породы (КК), шароле (Ш), дорпер-калмыцких помесей овцематок (½Д×½КК), полученного чистопородного и помесного молодняка; установление влияния генотипов по гену CAPN1 на живую массу и среднесуточный прирост. Установлено, что у баранов-производителей калмыцкой курдючной породы и шароле в гене CAPN1 чаще выявлялись носители аллеля С, тогда как среди чистопородных и помесных овцематок встречаемость аллелей С и Т была равной. У чистопородного молодняка и помесей ½Ш×½КК преобладали особи с аллелем Т,у помесей ½Ш×¼Д×¼КК – носители аллеля С. Популяционно-генетический анализ ни в одной из групп не выявил достоверных отличий наблюдаемых частот генотипов от теоретически ожидаемых при равновесии Харди-Вайнберга. Независимо от породной принадлежности и пола живая масса молодняка при рождении разных генотипов по гену CAPN1 была схожей, тогда как в четырехмесячном возрасте,как баранчики, так и ярочки с генотипом СС имели достоверное превосходство над сверстниками других генотипов. У чистопородных баранчиков наибольшая разность наблюдалась между животными генотипов СС и СТ, у помесей ½Ш×½КК – животных генотипов СС и ТТ, которая составила 10,4 и 8,1 %; 9,94 и 10,95 % (p < 0,05) соответственно. Среди ярочек наибольшие различия наблюдались при чистопородном разведении между животными генотипов СС и ТТ – 15,6 и 16,6 % (p < 0,05) соответственно.
овцы, калмыцкая курдючная порода, шароле, живая масса, кальпаин, генотип
Введение. Основной тенденцией развития овцеводства в последние десятилетия во всем мире является устойчивый рост производства баранины, что определяет увеличение доли специализированных мясных пород и возрастающие требования к качеству баранины [1, 2]. Маркер-ассоциированная селекция может быть одним из инструментов ускорения этого процесса. Исследования генетико-биохимических основ фенотипического полиморфизма признаков, определяющих мясную продуктивность, ведутся уже многие десятилетия. Известно, что большинство показателей продуктивности находится под совместным контролем значительного числа генов. Однако применение генетических маркеров в повышении мясной продуктивности овец по сравнению с другими видами сельскохозяйственных животных до настоящего времени является менее разработанной областью. Тем не менее выявление генов, ассоциированных с мясной продуктивностью, может быть перспективным, поскольку признаки, определяющие рост костной, мышечной и жировой тканей, характеризуются невысокой наследуемостью [3].
Ген кальпаина является одним из генов, который может быть использован в качестве маркера мясной продуктивности овец. Белок кальпаин, кодируемый геном CAPN, принадлежит семейству цитоплазматических кальцийзависимых протеиназ с папаиноподобной активностью [4]. Клеточный протеолитический аппарат высокоселективен и строго регулируется, так как избыточная деструкция жизненно необходимых белков или замедленная деградация короткоживущих регуляторных белков могут существенно изменить клеточные функции. Этот механизм, по всей видимости, у многих прокариот – результат совместной деятельности кальпаинов, лизосомальных катепсинов и протеасом [5]. Высоковариабельная структура обнаруженных последовательностей кальпаинов и кальпаиноподобных молекул свидетельствует о широком разнообразии выполняемых ими клеточных функций. Кальпаины принимают участие в основных кальцийзависимых клеточных процессах – передаче сигнала, клеточном цикле, пролиферации, дифференцировке, слиянии мембран, формировании мышечных волокон [6, 7]. Разрушение молекулярных комплексов прикрепления цитоскелета к мембране является наиболее выраженной функцией кальпаинов и подтверждается тем, что более 30 белков цитоскелета чувствительны к кальпаинам [8]. Ряд исследований показал, что кальпаин-кальпастатиновая система регулирует рост скелетных мышц, ускорение которого может быть результатом уменьшения деградации мышечного белка за счет снижения уровня кальпаина и увеличения активности кальпастатина [9].
Таким образом, полиморфные варианты гена кальпаина могут оказывать фенотипические эффекты на прижизненные количественные признаки у сельскохозяйственных животных, являющиеся внешним проявлением внутренних процессов, контролируемых кальпаиновой системой. Это свойство определило интерес к изучению полиморфизма кальпаина у некоторых пород овец [10–12]. Однако в породах овец российской селекции, а также при использовании зарубежного генофонда выполнено недостаточно исследований полиморфизма гена кальпаина, что определило актуальность настоящей работы.
Цель исследования – изучение фенотипического эффекта генотипов полиморфного гена кальпаина (CAPN1) на живую массу у овец пород калмыцкая курдючная и их помесей с породами шароле и дорпер для обоснования возможности генетического маркирования продуктивности в раннем возрасте.
Объекты и методы. Исследование проведено на базе хозяйства «АРЛ» (Республика Калмыкия, Яшкульский район). В хозяйстве используется пастбищно-стойловая система содержания, при которой 285 дней – пастбищный период. Трава естественных пастбищ, представленная в основном полынью, несколькими видами дерновидных злаков (ковыли, типчаки) и солянкой, занимает 75–80 % годового рациона овец. Дополнительно, в соответствии с физиологическим состоянием овцематок, используется около 7–10 % концентрированных кормов и 10–17 % заготовленных грубых кормов. Таким образом, их основной рацион состоит из 3–4 кг травы злаково-полынного пастбища, 1,5 кг злаково-бобового сена, 0,25 кг концентрированного корма (50 % ячменя, 40 % кукурузы, 10 % шрота подсолнечникового) и 0,08 кг минеральной подкормки.
Отбор образцов для генотипирования и учет показателей продуктивности проводили от животных калмыцкой курдючной породы (КК) мясо-сального направления продуктивности, шароле (Ш) мясо-шерстного направления продуктивности, а также помесей с шароле и дорпер (Д) – мясного направления продуктивности. Схема скрещивания была следующей: бараны-производители КК (n = 6), возраст 4,5 года, живая масса 89,3±1,1 кг; бараны-производители Ш (n = 2), возраст 3,5 года, живая масса 80,3 ± 1,1 кг; овцематки КК (n = 40): 20 – для чистопородного скрещивания, 20 – с баранами Ш, возраст 3–4 года, живая масса 62,3 ± 0,32 кг; овцематки ½Д×½КК (n = 40) возраст 3–4 года, живая масса 62,9 ± 0,31 кг.
Численность и распределение потомства по полу: группа 1 – КК (n = 26: ♂14 и♀12); группа 2 – ½Ш×½КК (n = 32: ♂12 и ♀20), группа 3 – ½Ш×¼Д×¼КК (n = 50: ♂16 и ♀34).
Экстракцию ДНК проводили из цельной крови овец набором ДНК-Экстран-1 («Синтол», Москва) согласно инструкции, предоставленной фирмой-производителем. Образцы геномной ДНК животных анализировали с использованием технологии HRM-анализа на приборе CFX96 (BioRad, США). Использовали следующие праймеры: F 5’-AACATTCTCAACAAAGTGGTG-3’ и R 5’-ACATCCATTACAGCCACCAT-3’. Условия проведения амплификации и HRM-анализа были следующими: 1) 95 °С – 4 мин; 2) (94 °С – 45 с, 62 °С – 45 с, 72 °С – 45 с) × 45 циклов; 3) 72 °С – 7 мин [13, 14]. Анализ результатов проводили с помощью программного обеспечения для HRM-анализа Precision Melt Analysis™ software.
Живую массу животных разных генотипов устанавливали путем взвешивания. У молодняка учитывали данный показатель при рождении и в 4 месяца. По разности значений и периода учета определяли среднесуточный прирост. Полученный материал обрабатывали биометрически, используя программу MS Excel. Достоверность различий сравниваемых показателей по группам оценивали по критерию Стьюдента с уровнем значимости не ниже p < 0,05.
Результаты и их обсуждение. При генотипировании использовали HRM-анализ (High Resolution Melts, HRM), основанный на определении различий в кривых плавления (диссоциации ДНК) после проведения ПЦР в реальном времени с помощью специального программного обеспечения. При плавлении продукта ПЦР двойная спираль ДНК диссоциирует с высвобождением интеркалирующего красителя и снижением уровня флуоресценции. Скорость этого процесса в зависимости от температуры отслеживается с помощью специального программного обеспечения, которое преобразует полученные данные в график кривой плавления. Изменения в графике могут быть очень небольшие, в доли градуса, однако этого достаточно, чтобы выявить однонуклеотидные замены (SNP), небольшие инсерции, делеции и метилирование ДНК [15].
Визуализация результатов генотипирования представлена на рисунке.
Результаты HRM-анализа в программе PrecisionMeltAnalysisТМsoftware
Характеристика популяционных частот аллелей С и Т CAPN1 среди чистопородного поголовья овец калмыцкой курдючной породы и ее помесей от скрещивания с породами шароле и дорпер приведена в таблице 1.
Таблица 1
Частоты аллелей С и Т CAPN1 у овец калмыцкой курдючной породы
и ее помесей от скрещивания с породами шароле и дорпер
|
Аллель |
Бараны |
Овцематки |
Молодняк |
Баранчики |
Ярочки |
|
Породная принадлежность |
|||||
|
КК |
КК |
КК |
|||
|
С |
0,667±0,08 |
0,500±0,05 |
0,231±0,03 |
0,214±0,06 |
0,250±0,07 |
|
Т |
0,333±0,08 |
0,500±0,05 |
0,769±0,03 |
0,786±0,06 |
0,750±0,07 |
|
|
Ш |
КК |
½Шх×½КК |
||
|
С |
0,750±0,22 |
0,500±0,05 |
0,344±0,03 |
0,417±0,08 |
0,300±0,05 |
|
Т |
0,250±0,22 |
0,500±0,05 |
0,656±0,03 |
0,583±0,08 |
0,700±0,05 |
|
|
Ш |
½ККх½Д |
½Ш×¼Д×¼КК |
||
|
С |
0,750±0,22 |
0,550±0,02 |
0,540±0,02 |
0,500±0,06 |
0,559±0,03 |
|
Т |
0,250±0,22 |
0,450±0,02 |
0,460±0,02 |
0,500±0,06 |
0,441±0,03 |
Анализ данных показывает, что частоты аллелей С и Т различны у родителей и потомства как при чистопородном разведении, так и при скрещивании. Так, у баранов-производителей и овцематок калмыцкой курдючной частота аллеля С составила 0,667 и 0,500 соответственно, тогда как у чистопородного потомства наблюдалось повышение частоты аллеля Т до 0,769, при снижении встречаемости аллеля С до 0,231. Аналогичное изменение частоты встречаемости аллелей наблюдалось и в группе помесного молодняка при использовании породы шароле. Если у баранов и овцематок аллель Т выявлялся с частотой 0,250 и 0,500, то у потомства его концентрация повысилась до 0,656, тогда как аллель С у родителей выявлялся с частотой 0,750 и 0,500, а у потомства его распространение снизилось до 0,344. Меньшие изменения в частоте встречаемости аллелей отмечались в потомстве, полученном от помесных калмыцких курдючных с породой дорпер овцематок и баранов породы шароле: аллели С и Т выявлялись практически с той же частотой, что и у матерей. При этом следует отметить, что в сравнении с потомством других вариантов разведения в этой группе было несколько большее переопределение в пользу аллеля С, что определило его большую частоту.
Сравнивая частоты аллелей среди всех групп, можно заключить, что среди баранов-производителей обеих пород в гене CAPN1 чаще выявлялись носители аллеля С, тогда как среди чистопородных и помесных маток носительство аллелей С и Т было практически равным; среди молодняка – у чистопородных и двухпородных помесей преобладали особи с аллелем Т, тогда как трех породных – носители аллеля С.
Анализ распределения генотипов в исследованных вариантах скрещивания и чистопородного разведения включал оценку соответствия наблюдаемого распределения генотипов теоретически ожидаемому согласно уравнению Харди-Вайнберга (табл. 2).
Таблица 2
Распределение генотипов и оценка генетического равновесия (χ2) в CAPN1 у овец калмыцкой курдючной породы и ее помесей от скрещивания с породами шароле и дорпер, %
|
Генотип |
Бараны |
Овцематки |
Молодняк |
Баранчики |
Ярочки |
|||||||||
|
Породная принадлежность |
||||||||||||||
|
КК |
КК |
КК |
||||||||||||
|
Н |
О |
Н |
О |
Н |
О |
Н |
О |
Н |
О |
|||||
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
||||
|
СС |
33,3 |
44,4 |
40,0 |
25,0 |
15,4 |
5,3 |
14,3 |
4,6 |
16,7 |
6,3 |
||||
|
СТ |
66,7 |
44,4 |
20,0 |
50,0 |
15,4 |
35,5 |
14,3 |
33,7 |
16,7 |
37,5 |
||||
|
ТТ |
0,0 |
11,1 |
40,0 |
25,0 |
69,2 |
59,2 |
71,4 |
61,7 |
66,7 |
56,3 |
||||
Окончание табл. 2
|
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
|
χ2 |
0,31 |
2,05 |
2,00 |
0,42 |
0,30 |
|||||
|
|
Ш |
КК |
½Ш×½КК |
|||||||
|
СС |
50,0 |
56,3 |
40,0 |
25,0 |
25,0 |
11,8 |
33,3 |
17,4 |
20,0 |
9,0 |
|
СТ |
50,0 |
37,5 |
20,0 |
50,0 |
18,8 |
45,1 |
16,7 |
48,6 |
20,0 |
42,0 |
|
ТТ |
0,0 |
6,3 |
40,0 |
25,0 |
56,3 |
43,1 |
50,0 |
34,0 |
60,0 |
49,0 |
|
χ2 |
1,33 |
2,05 |
3,66 |
0,99 |
1,16 |
|||||
|
|
Ш |
½ Д×½ КК |
½Ш×¼Д×¼КК |
|||||||
|
СС |
50,0 |
56,3 |
35,0 |
30,3 |
24,0 |
29,2 |
12,5 |
25,0 |
29,4 |
31,2 |
|
СТ |
50,0 |
37,5 |
40,0 |
49,5 |
60,0 |
49,7 |
75,0 |
50,0 |
52,9 |
49,3 |
|
ТТ |
0,0 |
6,3 |
25,0 |
20,3 |
16,0 |
21,2 |
12,5 |
25,0 |
17,6 |
19,5 |
|
χ2 |
1,33 |
0,28 |
0,55 |
0,81 |
0,02 |
|||||
Примечание: Н – наблюдаемые; О – теоретически ожидаемые значения; отклонение Н от О по закону Харди-Вайнберга значимо при χ2 ≥ 3,84.
Полученные данные не выявили ни в одной из групп достоверно значимого отклонения наблюдаемых генотипов от теоретически ожидаемых. Однако у баранов-производителей калмыцкой курдючной отмечалось некоторое увеличения доли гетерозигот (66,7 % наблюдаемой против 44,4 % ожидаемой), тогда как у овцематок это соотношение имело противоположный характер – снижение доли гетерозигот (20,0 % наблюдаемой против 50,0 % ожидаемой). У потомства отмечалось увеличение числа гетерозигот СТ и гомозигот ТТ (15,4 и 69,2 % против 35,5 и 59,2 % соответственно).
Сравнение полученных данных с результатами других исследований позволяет отметить, что расположенный между экзонами 5 и 6 полиморфизм, представляющий собой синонимичный переход Т/С в 44 нуклеотиде гена (AF309634.1) [12, 14], характеризуется разным соотношением генотипов СС, СТ, и ТТ у тех или иных пород. Так, генотип CC и аллель C являются наиболее частыми у трех египетских пород овец (барки, рахмани и оссими), при отсутствии генотипа ТТ у пород барки и оссими [15]. У овец породы бандур зарегистрированы два генотипа – СС и СТ с частотами 0,67 и 0,30 [16]. У курдских овец в этом локусе обнаружен незначительный избыток гетерозигот [17], тогда как у овец пород бандур [16] и зел [14], а также колумбийских креольских овец [18], наоборот, наблюдался их дефицит.
Анализ ассоциативной связи полиморфизма CAPN1 с живой массой и ее среднесуточным приростом у овец исследуемых групп был направлен на то, чтобы охарактеризовать особенности темпа роста чистопородного и помесного потомства разных генотипов (табл. 3).
Таблица 3
Живая масса баранов-производителей и овцематок различных генотипов по гену CAPN1
|
Породная принадлежность |
По всем генотипам, кг |
Генотип |
|||
|
СС |
СТ |
ТТ |
|||
|
Бараны-производители |
КК |
89,3±1,1 |
91,0±0,6 |
88,0±1,4 |
– |
|
Ш |
80,3±1,1 |
– |
81,4 |
79,2 |
|
|
Овцематки |
КК |
62,3±0,32 |
62,3±1,2 |
62,4±1,3 |
62,0±1,1 |
|
½ Д ×½ КК |
62,9±0,31 |
62,8±0,5 |
63,0±0,7 |
62,8±0,6 |
|
Сопоставление живой массы разных генотипов показало, что бараны-производители калмыцкой курдючной породы с генотипом СС имели тенденцию к превышению над носителями генотипа СТ. Однако, ввиду небольшого размера выборки, для интерпретации данного наблюдения как закономерности требуется расширение исследования с привлечением большего числа животных. Среди овцематок разной породной принадлежности не установлено достоверных различий по живой массе между животными разных генотипов в гене CAPN1. По-видимому, значительно более жесткий отбор среди баранов калмыцкой курдючной породы привел к тому, что из разведения исключались носители генотипа ТТ, при этом животные с генотипом СТ уступали по живой массе носителям СС генотипа, что в определенной степени свидетельствует о понижающем эффекте аллеля Т на живую массу баранов.
Показатели живой массы при рождении, в 4 месяца и среднесуточный прирост в этот период у чистопородного молодняка и от разных вариантов скрещивания, различных генотипов по гену CAPN1 представлены в таблице 4.
Таблица 4
Живая масса и среднесуточный прирост у чистопородного молодняка
и от разных вариантов скрещивания, различных генотипов по генуCAPN1
|
Генотип |
Породная принадлежность |
|||||||||||
|
КК×КК |
½ Ш ×½КК |
½Ш×¼ Д ×¼ КК |
||||||||||
|
Живая масса, кг |
Среднесуточный прирост, г |
Живая масса, кг |
Среднесуточный прирост, г |
Живая масса, кг |
Среднесуточный прирост, г |
|||||||
|
При рождении |
4 мес. |
При рождении |
4 мес. |
При рождении |
4 мес. |
|||||||
|
Баранчики |
||||||||||||
|
СС |
4,8±0,3 |
42,2±0,5* |
307±4,7* |
3,7±0,4 |
42,0±1,4* |
314±7,8* |
4,3±0,2 |
41,4±0,6 |
304±7,2 |
|||
|
СТ |
3,6±0,2 |
38,2±0,4 |
284±3,6 |
4,0±0,4 |
40,2±1,6 |
297±6,9 |
3,7±0,1 |
40,8±0,6 |
305±5,3 |
|||
|
ТТ |
4,3±0,3 |
41,9±0,4 |
308±2,7 |
3,7±0,2 |
38,2±1,2 |
283±9,1 |
5,2±0,3 |
41,6±0,5 |
298±5,7 |
|||
|
Ярочки |
||||||||||||
|
СС |
4,0±0,2 |
40,0±0,7* |
295±6,5* |
3,9±0,1 |
37,6±1,4 |
279±9,0 |
3,5±0,2 |
38,5±0,6 |
287±4,2 |
|||
|
СТ |
3,3±0,1 |
36,3±0,5 |
271±7,1 |
3,6±0,3 |
35,1±0,5 |
256±4,7 |
3,7±0,1 |
37,5±0,5 |
278±4,4 |
|||
|
ТТ |
3,7±0,1 |
34,6±0,6 |
253±5,8 |
3,5±0,1 |
36,0±0,8 |
266±7,0 |
4,0±0,1 |
37,2±1,3 |
272±8,7 |
|||
*p < 0,05.
Установлено, что независимо от породной принадлежности и пола живая масса молодняка при рождении разных генотипов по гену CAPN1 была схожей, тогда как в 4-месячном возрасте как баранчики, так и ярочки с генотипом СС имели достоверное превосходство над сверстниками других генотипов по живой массе и среднесуточному приросту. Так, у чистопородных баранчиков наибольшая разность была между животными генотипов СС и СТ, у помесей ½Ш×½КК – животных генотипов СС и ТТ, которая составила 10,4 и 8,1 %; 9,94 и 10,95 % (p < 0,05) соответственно. Среди ярочек наибольшие различия наблюдались при чистопородном разведении между животными генотипов СС и ТТ – 15,6 и 16,6 % (p < 0,05) соответственно. Следует отметить, что у ярочек-носителей генотипа СС во всех вариантах отмечена тенденция к большему уровню среднесуточного прироста в сравнении с животными, имеющими генотипы СТ и ТТ.
Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что у молодняка овец в ранний период роста и развития генотип СС в гене CAPN1 ассоциирован с большей живой массой, тогда как присутствие аллеля Т снижает ее уровень. Можно предположить, что положительное влияние на прирост живой массы аллеля С в гомозиготном состоянии будет прослеживаться и в более поздние возрастные периоды роста ягнят, что станет обоснованием целесообразности отбора носителей генотипа СС для увеличения численности животных с потенциально более высокой мясной продуктивностью. Однако для подтверждения этого суждения необходимо проведение дальнейших исследований на большей по численности выборке животных.
Заключение. Анализ результатов генотипирования полиморфизма в гене CAPN1 выявил, что среди баранов-производителей калмыцкой курдючной породы и шароле чаще выявлялись носители аллеля С, среди чистопородных и помесных маток носительство аллелей С и Т было практически равным; среди молодняка у КК и помесей ½Ш×½КК преобладали особи с аллелем Т, у помесей½Ш×¼Д×¼КК– носители аллеля С.
Популяционно-генетический анализ не выявил достоверных отличий наблюдаемых частот генотипов от теоретически ожидаемых при равновесии Харди-Вайнберга.
В 4-месячном возрасте как баранчики, так и ярочки с генотипом СС имели превосходство над сверстниками других генотипов по живой массе и среднесуточному приросту. Наибольшее превосходство выявлено при сравнении с животными генотипа СТ у чистопородных баранчиков и с генотипом ТТ у помесных животных ½Ш×½КК, которое соответственно составило 10,4 и 8,1 %; 9,94 и 10,95 % (p < 0,05). Среди ярочек наибольшие различия наблюдались при сравнении с особями генотипа ТТ при чистопородном разведении и составили 15,6 и 16,6 % (p < 0,05) соответственно.
1. Состояние и тенденции в производстве мяса домашних животных в мире и России / А.И. Ерохин [и др.] // Овцы, козы, шерстяное дело. 2021. № 2. С. 20–22.
2. Малышева Е.С., Бессонова Н.М. Оценка качественных характеристик баранины // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2016. № 4 (138). С. 124–127.
3. Генетические маркеры мясной продуктивности овец (Ovis aries L.). Сообщение I. Миостатин, кальпаин, кальпастатин / В.И. Трухачев [и др.] // Сельскохозяйственная биология. 2018. Т. 53, № 6. С. 1107–1119.
4. Немова Н.Н., Лысенко Л.А., Канцерова Н.П. Протеиназы семейства кальпаинов. Структура и функции // Онтогенез. 2010. Т. 41, № 5. С. 381–389.
5. The calpain system / D.E Goll [et al.] // Physio Rev., vol. 83, 2003, P. 731–801.
6. Glading A., Lauffenburger D.A., Wells A. Cutting to the chase: calpain proteases in cell motility // Trends Cell Biol. 2002. V. 12. P. 46–54.
7. Chondrogianni N., Fragoulis E.G., Gonos E.S. Protein degradation during aging: the lysosome, the calpain and the proteasome dependent cellular proteolytic systems // Biogerontology. 2002. V. 3. P. 121–123.
8. Dear T.N., Boehm T. Diverse mRNA expression patterns of the mouse calpain genes Capn5, Capn6, and Capn11 during development // Mech. Devel. 1999. V. 89. P. 201–209.
9. Barnoy S., Maki M., Kosower N.S. Overexpression of calpastatin inhibits L8 myoblast fusion // Biochem. Biophys. Res. Comm. 2005. V. 332. P. 697–701.
10. Genetic polymorphism at MTNR1A, CAST and CAPN loci in Iranian Karakul sheep / F.E. Shahroudi [et al.] // Iranian Journal of Biotechnology, 2006, 4(2): 117–122.
11. Variation in exon 10 of the ovine calpain 3 gene (CAPN3) and its association with meat yield in New Zealand Romney sheep / Q. Fang [et al.] // Meat Sci., 2013, 94(3): 388–390. DOI:https://doi.org/10.1016/j.meatsci.2013.03.015.
12. Association between single nucleotide polymorphism in ovine Calpain gene and growth performance in three Egyptian sheep breeds / K. Mahrous [et al.] // J. Genet. Eng. Biotechnol. 2016. 14, 233–240.
13. Polymorphism of Calpastatin, Calpain and myostatin genes in native Dalagh sheep in Iran / M.A. Azari [et al.] // Slovak Journal of Animal Science, 2012, 45(1): 1–6.
14. Genetic variability of calpastatin and calpain genes in iranianZel sheep using PCR-RFLP and PCR-SSCP methods. Iran / E. Dehnavi [et al.] // J. Biotechnol. 2012. 10, 136–139.
15. Михайлова М.Е., Романишко Е.Л. Определение полиморфизма гена эстрогенового рецептора ESR1-Pvu II, маркера плодовитости свиней, с помощью HRM-анализа // Молекулярная и прикладная генетика. 2014. Т. 17. С. 91–96.
16. Genetic polymorphism of ovine calpain gene in bandur sheep / N.S. Kumar [et al.] // International Journal of Science, Environment and Technology, 2015, 4(3): 804–812.
17. Calpastatin polymorphism and its association with daily gain in Kurdi sheep / M.R. Nassiry [et al.] // Iran. J. Biotecnol., 2006, 4(3): 188–192.
18. Montes D., Lenis C., Hernández D. Polymorphisms of the calpain and calpastatin genes in two populations of Colombian creole sheep // Rev. MVZ. 2015. Córdoba 24, 7113–7118.
