Russian Federation
FSBEI HE «Nothern Trans-Ural State Agricultural University» (kafedra anatomii i fiziologii, docent)
Russian Federation
Perm, Perm, Russian Federation
A distinctive feature of chlamydia is the often-asymptomatic course of the disease, and without timely, high-quality diagnosis, the pathogen can persist in the body for many months and even years, causing serious diseases and spreading unhindered among animals. The purpose of research is to study the morphological changes in the parenchyma of the testes of wild boar with chlamydia. The objects of the study are the testes of wild boars aged 10–11 months. Histological sections were cut on an MZP-01 technomy microtome with a thickness of 5 microns. The finished histological preparations were stained with hematoxylin-eosin, according to Van Gieson and Pavlovsky. Using microscopy of histological preparations, the structure of the testes and changes in them were studied. Microscopic examinations were carried out with a Micros microscope at a magnification of 200–400 times in 10 fields of view of correctly oriented sections. At least 100 cells were studied. The established numerical data were subjected to variable statistical processing according to Student using MS Excel 2010. When analyzing morphometric studies of the spermatogenic epithelium of the convoluted seminiferous tubules of the testes, it was noted that in the convoluted tubules that retained their structure, the thickness of the spermatogenic epithelium was 14.19 ± 0.23 μm, the number of cells Sertoli are smaller than spermatogonium and spermatocytes. As a result of the studies, we can conclude that in sick animals, already at a young age, the parenchyma is affected with the development of alterative processes, in which there is a decrease in spermatogenesis, which negatively affects the function of the testes, and mechanical transmission of infectious agents during mating is possible.
chlamydia, testes, histology, morphometry, animals, wild boar
Введение. Хламидиозы животных зарегистрированы на всех континентах земного шара и во многих регионах России. Хламидиоз является болезнью диких домашних животных, птиц и человека. Среди инфекционных заболеваний, приносящих огромный экономический ущерб, значительное место занимает хламидиоз. Заболевания животных хламидийной этиологии в настоящее время имеют тенденцию к широкому распространению. Патология протекает остро, хронически и бессимптомно, причем больные животные долгое время остаются хламидионосителями [1–3]. При заносе инфекции в стадо проявляется высокий уровень абортов у животных, что наносит большой экономический ущерб хозяйствам [4]. Также отмечается, что люди могут заражаться хламидиозом от инфицированных животных и птиц, в том числе от представителей дикой фауны, что требует определенного контроля заболевания ветеринарными службами страны. При этом у многих диких птиц и животных хламидиоз может протекать скрыто, без ярко выраженных клинических признаков, что затрудняет диагностику данного заболевания. При этом возбудитель может длительно выделяться в окружающую среду и инфицировать другие объекты [5–7].
Различные биологические варианты (подвиды) хламидий вызывают поражения различных органов и систем [8–11]. При определенных условиях, а именно при декомпенсации иммунологических функций, заболевание может переходить в глубокие системные поражения многих органов и тканей, а также провоцирует аутоиммунные реакции, когда антигеном становятся клеточные системы организма. Эта инфекция может прогрессировать в хроническую стадию с преимущественным поражением тазовых органов [12, 13]. Паразитируя в организме, хламидии вызывают широкий спектр клинических проявлений болезни, таких как аборты, пневмонии, энтериты, артриты, конъюнктивиты, уретриты, орхиты, энцефалиты и т.д., которые приводят к гибели животных. Изучению патогенеза хламидиоза посвящено большое количество работ, однако до настоящего времени эта проблема остается недостаточно изученной. Главной особенностью возбудителя является то, что он может поражать различные органы и ткани, вызывая глубокие поражения систем и органов.
Проведенный П.М. Митрофановым анализ морфогистологического состояния семенников естественно больных и экспериментально зараженных быков разного возраста показал, что хламидии могут вызывать альтеративные процессы в половых железах (дистрофию, некротизирование клеток Сертоли), это указывает, что они преодолевают гематотестикулярный барьер. Изначально процесс поражения лобулярный, а затем он становится более локальным и в патологический процесс вовлекаются 20–30 и более канальцев. Макроскопически, П.М. Митрофанов отмечает, что такие зоны представлены мелкими серовато-белыми или желтовато-белыми очажками. Они могут быть в виде тяжей и распространяются по всему семеннику [14].
Однако до сих пор недостаточно данных о морфофункциональных особенностях сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев в семенниках, тем более при патологических процессах [15].
Цель исследования – изучение морфологических изменений паренхимы семенников дикого кабана при хламидиозе.
Материал и методы. Исследование выполнялось на кафедре анатомии и физиологии ФГБОУ ВО ГАУ Северного Зауралья. При этом проводились гистологические исследования паренхимы семенников диких кабанов в возрасте 10–11 месяцев. При отборе проб учитывались морфологические особенности органа. Полученный материал фиксировался в 10 % забуференном формалине, далее проводился через спирты и заливался в парафин по общепринятой методике. После создания гистоблоков делали гистосрезы 5 мкм на микротоме «МЗП-01 техном». Для окраски использовались следующие методы: по Ван-Гизону, гематоксилин-эозином и по Павловскому [16]. При микроскопировании микроскопом Micros производили анализ общей картины и подсчет структур, таких как площадь извитого семенного канальца (мкм2), площадь просвета извитого семенного канальца (мкм2), толщина сперматогенного эпителия (мкм), количество клеток Сертоли в одном извитом канальце (шт.), площадь сперматогония (мкм2), диаметр сперматогония (мкм), количество сперматогония в одном извитом канальце (шт.), площадь сперматоцитов (мкм2), диаметр сперматоцитов (мкм). Все показатели измеряли при увеличении в 200–400 раз в 10 полях зрения правильно ориентированных срезов. Изучению подвергали не менее 100 клеток. Установленные числовые данные подвергали вариативной статистической обработке по Стьюденту.
Результаты и их обсуждение. Учеными, занимающимися изучением факторов распространения хламидийной инфекции и ее последствий, выявлено достаточное количество случаев заражения животных через инфицированную сперму.
При проведении изучения препаратов было отмечено, что при поражении хламидиозом капсула семенника утолщена и составляет 3,96 ± 0,09 мкм (рис. 1), представлена волокнистой соединительной тканью с участками разволокнения. В наружной оболочке имеются запустевшие артерии и вены.
Рис. 1. Хламидии в ткани семенника дикого кабана. Окраска по Павловскому. Ув. ×100
Ткань семенника без патологических изменений встречается во всех частях органа. Клетки сперматогенного эпителия представлены спермацитами вытянутой формы с крупным ядром, сперматидами – мелкими клетками со светлым ядром и поддерживающими клетками – вытянутой формы. Структура клеток сперматогенного эпителия достаточно сохранена. Но встречаются измененные части, которые характеризуются десквамацией эпителия извитых канальцев, отечностью в базальном слое (рис. 2).
Согласно данным некоторых исследователей, под влиянием микроорганизма происходит разрушение клеток. Возбудитель вместе с содержимым разрушенных клеток проникает в кровь, вызывая бактериемию, токсемию, аллергизацию макроорганизма, поражения различных паренхиматозных органов.
Рис. 2. Отек эпителиального слоя и дезорганизация сперматогенного эпителия.
Окраска по Ван-Гизону. Ув. ×100
Не во всех канальцах имеются сперматоциты и сперматиды, а также сперматозоиды, что говорит об ослаблении сперматогенеза. В пространстве между извитыми канальцами наблюдается большое количество рыхлой волокнистой соединительной ткани. Отмечаются участки некроза и пролиферативных процессов (рис. 3). Единичные канальца превращены в фибринозные трубки. Такие участки при макроскопическом изучении имеют вид тяжей или очагов серо-белого цвета.
Данные морфометрии сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников представлены в таблице.
Рис. 3. Измененные извитые канальца семенника, очаги некроза и замена пораженных участков соединительной тканью. Окраска гематоксилин-эозином. Ув. ×100
Морфометрия сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников
|
Показатель |
Значение |
|
Площадь извитого семенного канальца, мкм2 |
4216,18±65,29 |
|
Площадь просвета извитого семенного канальца, мкм2 |
732,88±12,72 |
|
Толщина сперматогенного эпителия, мкм |
14,19±0,23 |
|
Количество клеток Сертоли в одном извитом канальце |
19,83±0,24 |
|
Площадь сперматогония, мкм2 |
91,23±1,91 |
|
Диаметр сперматогония, мкм |
10,97±0,09 |
|
Количество сперматогония в одном извитом канальце |
27,50±0,15 |
|
Площадь сперматоцитов, мкм2 |
238,48±2,24 |
|
Диаметр сперматоцитов, мкм |
17,70±0,11 |
|
Количество сперматоцитов в одном извитом канальце |
8,33±0,07 |
При изучении морфометрических показателей сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников (см. табл.) было отмечено, что в извитых канальцах, сохранивших свою структуру, толщина сперматогенного эпителия составила 14,19 ± 0,23 мкм, количество клеток Сертоли меньше, чем сперматогойний и сперматоцитов.
Заключение. Таким образом, на основании проведенных исследований семенников диких кабанов при хламидиозе можно сделать вывод, что у больных животных уже в молодом возрасте поражается паренхима с развитием альтеративных процессов, при которых происходит снижение сперматогенеза, отрицательно сказывающееся на функции семенников, и возможна механическая передача инфекционных агентов во время спаривания.
1. Kochetova O.V., Tatarnikova N.A., Sidorova K.A. Ul'trastrukturnye povrezhdeniya pecheni i pochki krys pri eksperimental'nom hlamidioze // Penitenciarnaya sistema i obschestvo: opyt vzaimodeystviya: sb. mat-lov VIII Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. (Perm', 6–8 aprelya 2021) / Perm. in-t Feder. sluzhby ispolneniya nakazaniy Perm', 2021. T. 1. S. 212–218.
2. Kochetova O.V., Tatarnikova N.A., Dragich O.A. Patomorfologicheskie izmeneniya v tkanyah semennika krys pri eksperimental'noy hlamidiynoy infekcii // Penitenciarnaya sistema i obschestvo: opyt vzaimodeystviya: sb. mat-lov VI Mezhdunar. nauch.-prakt. konf. (Perm', 2–4 aprelya 2019) / Permskiy institut Federal'noy sluzhby ispolneniya nakazaniy. Perm', 2019. T. 2. S. 25–29.
3. Kochetova O.V. Morfologiya gemato-encefalicheskogo bar'era pri eksperimental'nom i spontannom hlamidioze zhivotnyh: avtoref. dis. ... kand. veterinar. nauk: 06.02.01. Tyumen', 2010. S. 24.
4. Gal'ceva, A.A. Monitoring epizooticheskoy situacii po hlamidiozu sel'skohozyaystvennyh zhivotnyh // Aktual'nye voprosy veterinarnoy mediciny: obrazovanie, nauka, praktika: sb. mat-lov Vseros. (nac.) konf., posvyasch. 30-letiyu obrazovaniya veterinarnogo fakul'teta (Tyumen', 15 maya 2022 g.) / Gos. agrar. un-t Severnogo Zaural'ya. Tyumen', 2022. S. 239–244.
5. Vstrechaemost' seropozitivnyh reakciy k infekcionnym zabolevaniyam sredi melkih hischnikov na prigranichnyh territoriyah Lazovskogo zapovednika / M.S. Goncharuk [i dr.] // Zoologicheskiy zhurnal. 2012. T. 91, № 3. S. 355.
6. Karimov M.Z., Karmazina A.A. Izuchenie epizooticheskih dannyh po hlamidiozu severnyh oleney v usloviyah Tyumenskoy oblasti // Regional'noe obrazovanie XXI veka: problemy i perspektivy. 2011. № 2. S. 110.
7. Mil'shteyn I.M. Epizootologicheskiy monitoring hlamidioza zhivotnyh i ptic po Ural'skomu federal'nomu okrugu // Molodezh' i nauka. 2012. № 1. S. 75–77.
8. Kochetova O.V., Tatarnikova N.A. Patomorfogenez gistogematicheskih bar'erov v sisteme «mat' – placenta – plod» pri hlamidioze zhivotnyh: monografiya / Perm. in-t Feder. sluzhby ispolneniya nakazaniy. Perm', 2021. 361 s.
9. Mil'shteyn I.M. Sistema protivoepizooticheskih meropriyatiy pri hlamidioze plotoyadnyh zhivotnyh na territorii Sverdlovskoy oblasti // Agrarnyy vestnik Urala. 2010. № 11-2 (78). S. 34.
10. Hlamidiozy zhivotnyh i cheloveka / V.A. Fedorova [i dr.]. M.: Nauka, 2019. 135 s.
11. Vasenko D.Yu., Kruglova M.I. Sovremennye aspekty hlamidiynoy infekcii zhivotnyh // Nauchnye osnovy proizvodstva i obespecheniya kachestva biologicheskih preparatov: mat-ly Mezhdunar. prakt. konf., posvyasch. 100-letiyu Armavirskoy biofabriki (Armavir, 20–21 avgusta 2021 g.) / Vseros. nauch.-issled. i tehnolog. in-t biol. promyshlennosti. Armavir, 2021. S. 234–244. DOI:https://doi.org/10.47804/978-5-89904-0290_2021_ 234.
12. Kochetova O.V. Morfopatologicheskie processy v semennikah pri eksperimental'nom hlamidioze krys // Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2014. № 5 (49). S. 113–115.
13. Tatarnikova N.A., Kochetova O.V., Sidorova K.A. Morfogenez tkaney mozzhechka pri eksperimental'nom hlamidioze krys // Uchenye zapiski Kazanskoy gosudarstvennoy akademii veterinarnoy mediciny im. N.E. Baumana. 2019. T. 237, № 1. S. 99–102. DOI:https://doi.org/10.31588/2413-4201-1883-237-1-99-102.
14. Mitrofanov P.M. Genital'nyy hlamidioz i besplodie bykov // Veterinariya. 2010. № 2. S. 23–30.
15. Dudenkova N.A., Shubina O.S. Morfologicheskie i morfometricheskie osobennosti stroeniya spermatogennogo epiteliya semennikov samcov belyh krys // Nauchnye issledovaniya i razrabotki k vnedreniyu v APK: mat-ly mezhdunar. nauch.-prakt. konf. molodyh uchenyh. Molodezhnyy, 2021. S. 423–427.
16. Honin G.A., Barashkova S.A., Semchenko V.V. Morfologicheskie metody issledovaniya v veterinarnoy medicine: ucheb. posobie. Omsk: Omskaya oblastnaya tipografiya, 2004. 198 s.
