Россия
ФГБОУ ВО ГАУ Северного Зауралья (кафедра анатомии и физиологии, доцент)
Россия
Пермь, Пермский край, Россия
Отличительной чертой хламидиозов является зачастую бессимптомное течение болезни, и без своевременной качественной диагностики возбудитель в течение многих месяцев и даже лет может персистировать в организме, вызывая серьезные заболевания и беспрепятственно распространяясь среди животных. Цель исследования – изучение морфологических изменений паренхимы семенников дикого кабана при хламидиозе. Объектами исследования являются семенники диких кабанов в возрасте 10–11 месяцев. Гистологические срезы нарезались на микротоме «МЗП-01 техном» толщиной 5 мкм. Готовые гистологические препараты окрашивали гематоксилин-эозином, по Ван-Гизону и по Павловскому. При микроскопии гистологических препаратов изучали структуру семенников и изменения в них. Микроскопические исследования осуществляли микроскопом «Micros» при увеличении в 200–400 раз в 10 полях зрения правильно ориентированных срезов. Изучению подвергали не менее 100 клеток. Установленные числовые данные подвергали вариативной статистической обработке по Стьюденту с использованием MS Excel 2010. При анализе морфометрических исследований сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников было отмечено, что в извитых канальцах, сохранивших свою структуру, толщина сперматогенного эпителия составила 14,19 ± 0,23 мкм, количество клеток Сертоли меньше, чем сперматогойний и сперматоцитов. В результате проведенных исследований можно сделать вывод, что у больных животных уже в молодом возрасте поражается паренхима с развитием альтеративных процессов, при которых происходит снижение сперматогенеза, которое отрицательно сказывается на функции семенников, и возможна механическая передача инфекционных агентов во время спаривания.
хламидиоз, семенники, гистология, морфометрия, животные, кабан
Введение. Хламидиозы животных зарегистрированы на всех континентах земного шара и во многих регионах России. Хламидиоз является болезнью диких домашних животных, птиц и человека. Среди инфекционных заболеваний, приносящих огромный экономический ущерб, значительное место занимает хламидиоз. Заболевания животных хламидийной этиологии в настоящее время имеют тенденцию к широкому распространению. Патология протекает остро, хронически и бессимптомно, причем больные животные долгое время остаются хламидионосителями [1–3]. При заносе инфекции в стадо проявляется высокий уровень абортов у животных, что наносит большой экономический ущерб хозяйствам [4]. Также отмечается, что люди могут заражаться хламидиозом от инфицированных животных и птиц, в том числе от представителей дикой фауны, что требует определенного контроля заболевания ветеринарными службами страны. При этом у многих диких птиц и животных хламидиоз может протекать скрыто, без ярко выраженных клинических признаков, что затрудняет диагностику данного заболевания. При этом возбудитель может длительно выделяться в окружающую среду и инфицировать другие объекты [5–7].
Различные биологические варианты (подвиды) хламидий вызывают поражения различных органов и систем [8–11]. При определенных условиях, а именно при декомпенсации иммунологических функций, заболевание может переходить в глубокие системные поражения многих органов и тканей, а также провоцирует аутоиммунные реакции, когда антигеном становятся клеточные системы организма. Эта инфекция может прогрессировать в хроническую стадию с преимущественным поражением тазовых органов [12, 13]. Паразитируя в организме, хламидии вызывают широкий спектр клинических проявлений болезни, таких как аборты, пневмонии, энтериты, артриты, конъюнктивиты, уретриты, орхиты, энцефалиты и т.д., которые приводят к гибели животных. Изучению патогенеза хламидиоза посвящено большое количество работ, однако до настоящего времени эта проблема остается недостаточно изученной. Главной особенностью возбудителя является то, что он может поражать различные органы и ткани, вызывая глубокие поражения систем и органов.
Проведенный П.М. Митрофановым анализ морфогистологического состояния семенников естественно больных и экспериментально зараженных быков разного возраста показал, что хламидии могут вызывать альтеративные процессы в половых железах (дистрофию, некротизирование клеток Сертоли), это указывает, что они преодолевают гематотестикулярный барьер. Изначально процесс поражения лобулярный, а затем он становится более локальным и в патологический процесс вовлекаются 20–30 и более канальцев. Макроскопически, П.М. Митрофанов отмечает, что такие зоны представлены мелкими серовато-белыми или желтовато-белыми очажками. Они могут быть в виде тяжей и распространяются по всему семеннику [14].
Однако до сих пор недостаточно данных о морфофункциональных особенностях сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев в семенниках, тем более при патологических процессах [15].
Цель исследования – изучение морфологических изменений паренхимы семенников дикого кабана при хламидиозе.
Материал и методы. Исследование выполнялось на кафедре анатомии и физиологии ФГБОУ ВО ГАУ Северного Зауралья. При этом проводились гистологические исследования паренхимы семенников диких кабанов в возрасте 10–11 месяцев. При отборе проб учитывались морфологические особенности органа. Полученный материал фиксировался в 10 % забуференном формалине, далее проводился через спирты и заливался в парафин по общепринятой методике. После создания гистоблоков делали гистосрезы 5 мкм на микротоме «МЗП-01 техном». Для окраски использовались следующие методы: по Ван-Гизону, гематоксилин-эозином и по Павловскому [16]. При микроскопировании микроскопом Micros производили анализ общей картины и подсчет структур, таких как площадь извитого семенного канальца (мкм2), площадь просвета извитого семенного канальца (мкм2), толщина сперматогенного эпителия (мкм), количество клеток Сертоли в одном извитом канальце (шт.), площадь сперматогония (мкм2), диаметр сперматогония (мкм), количество сперматогония в одном извитом канальце (шт.), площадь сперматоцитов (мкм2), диаметр сперматоцитов (мкм). Все показатели измеряли при увеличении в 200–400 раз в 10 полях зрения правильно ориентированных срезов. Изучению подвергали не менее 100 клеток. Установленные числовые данные подвергали вариативной статистической обработке по Стьюденту.
Результаты и их обсуждение. Учеными, занимающимися изучением факторов распространения хламидийной инфекции и ее последствий, выявлено достаточное количество случаев заражения животных через инфицированную сперму.
При проведении изучения препаратов было отмечено, что при поражении хламидиозом капсула семенника утолщена и составляет 3,96 ± 0,09 мкм (рис. 1), представлена волокнистой соединительной тканью с участками разволокнения. В наружной оболочке имеются запустевшие артерии и вены.
Рис. 1. Хламидии в ткани семенника дикого кабана. Окраска по Павловскому. Ув. ×100
Ткань семенника без патологических изменений встречается во всех частях органа. Клетки сперматогенного эпителия представлены спермацитами вытянутой формы с крупным ядром, сперматидами – мелкими клетками со светлым ядром и поддерживающими клетками – вытянутой формы. Структура клеток сперматогенного эпителия достаточно сохранена. Но встречаются измененные части, которые характеризуются десквамацией эпителия извитых канальцев, отечностью в базальном слое (рис. 2).
Согласно данным некоторых исследователей, под влиянием микроорганизма происходит разрушение клеток. Возбудитель вместе с содержимым разрушенных клеток проникает в кровь, вызывая бактериемию, токсемию, аллергизацию макроорганизма, поражения различных паренхиматозных органов.
Рис. 2. Отек эпителиального слоя и дезорганизация сперматогенного эпителия.
Окраска по Ван-Гизону. Ув. ×100
Не во всех канальцах имеются сперматоциты и сперматиды, а также сперматозоиды, что говорит об ослаблении сперматогенеза. В пространстве между извитыми канальцами наблюдается большое количество рыхлой волокнистой соединительной ткани. Отмечаются участки некроза и пролиферативных процессов (рис. 3). Единичные канальца превращены в фибринозные трубки. Такие участки при макроскопическом изучении имеют вид тяжей или очагов серо-белого цвета.
Данные морфометрии сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников представлены в таблице.
Рис. 3. Измененные извитые канальца семенника, очаги некроза и замена пораженных участков соединительной тканью. Окраска гематоксилин-эозином. Ув. ×100
Морфометрия сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников
Показатель |
Значение |
Площадь извитого семенного канальца, мкм2 |
4216,18±65,29 |
Площадь просвета извитого семенного канальца, мкм2 |
732,88±12,72 |
Толщина сперматогенного эпителия, мкм |
14,19±0,23 |
Количество клеток Сертоли в одном извитом канальце |
19,83±0,24 |
Площадь сперматогония, мкм2 |
91,23±1,91 |
Диаметр сперматогония, мкм |
10,97±0,09 |
Количество сперматогония в одном извитом канальце |
27,50±0,15 |
Площадь сперматоцитов, мкм2 |
238,48±2,24 |
Диаметр сперматоцитов, мкм |
17,70±0,11 |
Количество сперматоцитов в одном извитом канальце |
8,33±0,07 |
При изучении морфометрических показателей сперматогенного эпителия извитых семенных канальцев семенников (см. табл.) было отмечено, что в извитых канальцах, сохранивших свою структуру, толщина сперматогенного эпителия составила 14,19 ± 0,23 мкм, количество клеток Сертоли меньше, чем сперматогойний и сперматоцитов.
Заключение. Таким образом, на основании проведенных исследований семенников диких кабанов при хламидиозе можно сделать вывод, что у больных животных уже в молодом возрасте поражается паренхима с развитием альтеративных процессов, при которых происходит снижение сперматогенеза, отрицательно сказывающееся на функции семенников, и возможна механическая передача инфекционных агентов во время спаривания.
1. Кочетова О.В., Татарникова Н.А., Сидорова К.А. Ультраструктурные повреждения печени и почки крыс при экспериментальном хламидиозе // Пенитенциарная система и общество: опыт взаимодействия: сб. мат-лов VIII Междунар. науч.-практ. конф. (Пермь, 6–8 апреля 2021) / Перм. ин-т Федер. службы исполнения наказаний Пермь, 2021. Т. 1. С. 212–218.
2. Кочетова О.В., Татарникова Н.А., Драгич О.А. Патоморфологические изменения в тканях семенника крыс при экспериментальной хламидийной инфекции // Пенитенциарная система и общество: опыт взаимодействия: сб. мат-лов VI Междунар. науч.-практ. конф. (Пермь, 2–4 апреля 2019) / Пермский институт Федеральной службы исполнения наказаний. Пермь, 2019. Т. 2. С. 25–29.
3. Кочетова О.В. Морфология гемато-энцефалического барьера при экспериментальном и спонтанном хламидиозе животных: автореф. дис. ... канд. ветеринар. наук: 06.02.01. Тюмень, 2010. С. 24.
4. Гальцева, А.А. Мониторинг эпизоотической ситуации по хламидиозу сельскохозяйственных животных // Актуальные вопросы ветеринарной медицины: образование, наука, практика: сб. мат-лов Всерос. (нац.) конф., посвящ. 30-летию образования ветеринарного факультета (Тюмень, 15 мая 2022 г.) / Гос. аграр. ун-т Северного Зауралья. Тюмень, 2022. С. 239–244.
5. Встречаемость серопозитивных реакций к инфекционным заболеваниям среди мелких хищников на приграничных территориях Лазовского заповедника / М.С. Гончарук [и др.] // Зоологический журнал. 2012. Т. 91, № 3. С. 355.
6. Каримов М.З., Кармазина А.А. Изучение эпизоотических данных по хламидиозу северных оленей в условиях Тюменской области // Региональное образование XXI века: проблемы и перспективы. 2011. № 2. С. 110.
7. Мильштейн И.М. Эпизоотологический мониторинг хламидиоза животных и птиц по Уральскому федеральному округу // Молодежь и наука. 2012. № 1. С. 75–77.
8. Кочетова О.В., Татарникова Н.А. Патоморфогенез гистогематических барьеров в системе «мать – плацента – плод» при хламидиозе животных: монография / Перм. ин-т Федер. службы исполнения наказаний. Пермь, 2021. 361 с.
9. Мильштейн И.М. Система противоэпизоотических мероприятий при хламидиозе плотоядных животных на территории Свердловской области // Аграрный вестник Урала. 2010. № 11-2 (78). С. 34.
10. Хламидиозы животных и человека / В.А. Федорова [и др.]. М.: Наука, 2019. 135 с.
11. Васенко Д.Ю., Круглова М.И. Современные аспекты хламидийной инфекции животных // Научные основы производства и обеспечения качества биологических препаратов: мат-лы Междунар. практ. конф., посвящ. 100-летию Армавирской биофабрики (Армавир, 20–21 августа 2021 г.) / Всерос. науч.-исслед. и технолог. ин-т биол. промышленности. Армавир, 2021. С. 234–244. DOI:https://doi.org/10.47804/978-5-89904-0290_2021_ 234.
12. Кочетова О.В. Морфопатологические процессы в семенниках при экспериментальном хламидиозе крыс // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2014. № 5 (49). С. 113–115.
13. Татарникова Н.А., Кочетова О.В., Сидорова К.А. Морфогенез тканей мозжечка при экспериментальном хламидиозе крыс // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. 2019. Т. 237, № 1. С. 99–102. DOI:https://doi.org/10.31588/2413-4201-1883-237-1-99-102.
14. Митрофанов П.М. Генитальный хламидиоз и бесплодие быков // Ветеринария. 2010. № 2. С. 23–30.
15. Дуденкова Н.А., Шубина О.С. Морфологические и морфометрические особенности строения сперматогенного эпителия семенников самцов белых крыс // Научные исследования и разработки к внедрению в АПК: мат-лы междунар. науч.-практ. конф. молодых ученых. Молодежный, 2021. С. 423–427.
16. Хонин Г.А., Барашкова С.А., Семченко В.В. Морфологические методы исследования в ветеринарной медицине: учеб. пособие. Омск: Омская областная типография, 2004. 198 с.